เมลลิติน CAS 20449-79-0

ฮาเบอร์มันต์รายงานว่าเปปไทด์พิษผึ้ง 1 μ Mol/L สามารถป้องกันการแพร่กระจายของเซลล์เนื้องอกได้ แต่ไม่ได้ยับยั้งการเจริญเติบโตและอัตราการโคลนนิ่งของเซลล์ปกติ

วลาศักดิ์ และคณะ ใช้การถอดรหัสแบบย้อนกลับ mRNA-DNA เพื่อสร้างห้องสมุด cDNA ของต่อมพิษผึ้งราชินีโดยใช้พลาสมิด pBR322 พวกเขาแยก cDNA ของเมลิทตินออกจากห้องสมุดนี้โดยใช้ mRNA ทั้งหมดของต่อมพิษผึ้งราชินีเป็นตัวตรวจสอบ และทำการโคลนเพิ่มเติมบนพลาสมิด pUC18 เพื่อการวิเคราะห์ลำดับดีเอ็นเอ ลำดับเมลิตตินที่คาดการณ์ไว้จากผลการวิเคราะห์ลำดับดีเอ็นเอเหมือนกันกับลำดับที่วัดจริง

Zhang Qingwen เริ่มสกัด RNA จากต่อมพิษผึ้งนางพญาเพื่อแปลผลในไข่ของหนอนเจาะสมอฝ้าย ซึ่งประสบความสำเร็จในการสังเคราะห์ Promelitin และศึกษาส่วนประกอบของ mRNA ที่สกัดได้ ผลการวิจัยพบว่า mRNA เมลิตตินที่มีความบริสุทธิ์สูงสามารถหาได้โดยการนำ rRNA ออกจาก RNA ทั้งหมด

Arora เปรียบเทียบความสามารถในการป้องกันความเสียหายจากการขาดออกซิเจนของเซลล์ตับหนูปกติกับเซลล์มะเร็งตับหนู และยืนยันว่า melittin active phospholipase A2 (PLA2) สามารถบรรเทาความต้านทานของเซลล์มะเร็งตับต่อภาวะขาดออกซิเจนได้ ดันน์ และคณะ หลอมรวมยีน SCFV ของแอนติบอดีที่ได้มาจากเซลล์มะเร็งไขกระดูกของมนุษย์และเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองที่ผิวเซลล์โปรตีนจำเพาะกับยีนเปปไทด์พิษผึ้งเพื่อสร้างยีนต้านสารพิษที่สามารถฆ่าเซลล์เนื้องอกได้ ยีนที่ถูกหลอมรวมจะแสดงออกมาในเชื้อ E. coli และสารต้านพิษที่ผ่านการกลั่นแล้วแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพในการฆ่าเซลล์เนื้องอก ในหลอดทดลอง ชนิดและคณะ สกัด mRNA ทั้งหมดจากต่อมพิษของผึ้งนางพญาบริสุทธิ์ และพบว่า mRNA ของเมลิตตินมีคู่เบสประมาณ 400 คู่และหางโพลีเอสั้น การทดลองของ Haase แสดงให้เห็นว่า Melittin สามารถกระตุ้นไลเปสของเซลล์ได้ รวมถึง phospholipase C (PLC), phospholipase D (PLD), phospholipase A2 (PLA2) และไตรกลีเซอไรด์

หลี่ จี้โจว และคณะ สังเคราะห์ยีนเปปไทด์พิษผึ้งผ่านการถอดรหัส mRNA cDNA แบบย้อนกลับ โดยใช้ แล GT11 สร้างไลบรารี cDNA ของเปปไทด์พิษผึ้งและคัดกรองโคลนเชิงบวกที่แสดงเปปไทด์เม็ดเลือดแดงแตกของพิษผึ้งโดยใช้โพรบแอนติบอดี เบนาชีร์ และคณะ ใช้แคลซีนเป็นเครื่องหมายเรืองแสงเพื่อศึกษาการรั่วไหลของเมมเบรนที่เกิดจากเมลิตตินอย่างเป็นระบบ เชื่อกันว่ามีความผูกพันระหว่างเมลลิตินและถุงน้ำเกิดขึ้นเร็วมากและภายใต้การกระทำของเมลิตติน บางถุงจะปล่อยสิ่งที่อยู่ภายในออกทั้งหมด ในขณะที่บางถุงยังคงไม่บุบสลาย อัตราส่วนของการปล่อยเนื้อหาสัมพันธ์กับอัตราส่วนโมลของเมลิตติน/ไขมัน โดยเฉพาะอย่างยิ่ง เมลิตตินสามารถแยกแยะความแตกต่างระหว่างถุงที่ยังไม่บุบสลายและถุงที่หลั่งออกมาแล้ว และมันบ่งชี้ว่าการมีประจุลบบนพื้นผิวของชั้นฟอสโฟไลปิดมีฤทธิ์ยับยั้งต่อความสามารถสลายของเมลิตติน ซึ่งเป็นสัดส่วนกับความหนาแน่นของประจุลบ

คุโบะ และคณะ เปรียบเทียบเมลิตตินกับโปรตีนอัลคาไลน์หลักของอีโอซิโนฟิลโดยใช้วิธีวิเคราะห์พิษต่อเซลล์ห้าวิธี ผลลัพธ์ยืนยันว่าเมลิตตินสามารถแทรกเข้าไปในเยื่อหุ้มเซลล์ของเซลล์ K562 และสร้างรูพรุน ทำให้เกิดการไหลเข้าของ Ca2+ เพิ่มความเข้มข้นของ Ca ในเซลล์2+ และการสลายเซลล์ ภายใน 1 ชั่วโมง เมลิตตินจะมีผลในการฆ่าเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวที่ทดลองทั้งหมด แชมเชอร์ และคณะ พบว่าเมลิตตินสามารถกระตุ้นการทำงานของฟอสโฟไลเปส D และต่อมาสลายเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดโมโนไซติกของมนุษย์ (U937)

วังควานลิน และคณะ สกัด RNA ทั้งหมดจากต่อมพิษผึ้งและขยาย cDNA ของโปรตีนสารตั้งต้นของเมลิตตินผ่าน RT-PCR พวกเขาเพิ่มเติมแนะนำตำแหน่งที่แยกเอมีนก่อนลำดับเมลิตตินผ่านการกลายพันธุ์แบบกำหนดเป้าหมาย และสร้างลำดับที่เกี่ยวข้องกับเมลิตติน - เวกเตอร์การแสดงออกของโปรตีนกลายพันธุ์เปปไทด์พิษผึ้งที่หลอมรวมกับลำดับบางส่วนของกาแลคโตซิเดส และผลการวิเคราะห์ลำดับแสดงให้เห็นว่าพวกเขาประสบความสำเร็จในการแนะนำ โคดอนเป้าหมายและสัมพันธ์กับ - ลำดับบางส่วนของกาแลคโตซิเดสสร้างกรอบการอ่านที่ถูกต้องและแสดงออกถึงโปรตีนที่ทำให้เกิดการกลายพันธุ์ใน Escherichia coli

หวงเสวี่ยเฉียง และคณะ สังเกตผล pro apoptotic ของ melittin ต่อเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวของมนุษย์ และพบว่าผลของ melittin 5 มก./มล. ต่อเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวเป็นเวลา 4 ชั่วโมงแตกต่างจากผลที่ 4 ชั่วโมง μ ลักษณะการตายแบบ apoptotic โดยทั่วไปถูกสังเกตหลังจาก 24 ชั่วโมงของการรักษาด้วยผึ้ง g/mL เปปไทด์พิษ การทดลองเพิ่มเติมแสดงให้เห็นว่าการเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์มีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับการลดลงของการแสดงออกของยีน bcl-2 หวัง ชิวโป และคณะ สังเคราะห์โอลิโกนิวคลีโอไทด์สองชิ้นส่วนของ AB ที่มีจุดแตกแยกเฉพาะโดยการสังเคราะห์เทียม และสร้างยีนเป้าหมายภายใต้การกระทำของเอนไซม์ Klenow พวกเขาใช้ข้อจำกัดเอนโดนิวคลีเอส Hind III และ Xmn I เพื่อแยกยีนเป้าหมายและเวกเตอร์นิพจน์ Pmal-p2 พลาสมิดไปพร้อมๆ กัน และสร้างรีคอมบิแนนต์ของทั้งสองภายใต้การกระทำของ T4 ligase - การคัดกรองเสริมถูกนำมาใช้เพื่อระบุโคลนเสริมและเอนไซม์เฉพาะ ทำการวิเคราะห์การย่อยอาหารและลำดับเพื่อให้ได้โคลนการแสดงออกของโปรคาริโอตของเปปไทด์พิษผึ้งชนิดรีคอมบิแนนท์

หลิวหลิง และคณะ ได้ทำการศึกษาเกี่ยวกับเซลล์มะเร็งตับสามสายพันธุ์ ได้แก่ SMMC-7721, BEL-7402 และ Hep-3B โดยใช้วิธี MTT เพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่างขนาดยากับการตอบสนองต่อเมลิตตินในการยับยั้งเนื้องอก ผลการวิจัยพบว่าผลการยับยั้งของเมลิตตินต่อเนื้องอกอยู่ระหว่าง 8 ถึง 64 μ ที่ขนาดกรัม/มิลลิลิตร อัตราการยับยั้งเนื้องอกของเมลิตตินจะเพิ่มขึ้นเป็นเส้นตรง และแสดงฤทธิ์ต้านเนื้องอกอย่างมีนัยสำคัญ ในหลอดทดลอง จากการคาดเดานี้อาจเกี่ยวข้องกับการรวมตัวของเมลิตตินที่ความเข้มข้นสูงด้วยตนเอง ที่ความเข้มข้นสูง ส่วนใหญ่จะปรากฏในสถานะเททราเมริก ซึ่งมีประสิทธิผลมากกว่าในการจับกับเยื่อหุ้มเซลล์เมื่อเปรียบเทียบกับโมโนเมอร์ ดังนั้นจึงสร้างช่องไอออน เปลี่ยนการซึมผ่านของเมมเบรน เปลี่ยนเยื่อหุ้มเซลล์ และแสดงฤทธิ์ต้านเนื้องอกในหลอดทดลองอย่างรุนแรง .

Li Bai, Zhang Chen และคนอื่นๆ แสดงให้เห็นผ่านการวิจัยทางพันธุวิศวกรรมว่า melittin มีฤทธิ์กระตุ้นการตายของเซลล์เนื้องอก หลังจากการถ่ายยีนด้วยอะดีโนไวรัสรีคอมบิแนนท์ที่มียีนเมลิตติน เซลล์มะเร็งตับบางชนิดแสดงการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยา เช่น สัณฐานวิทยาอะพอพโทติก ปริมาตรที่ลดลง ความกลม และการรวมตัวของขอบโครมาตินภายใต้กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์เฟสกลับหัว อะดีโนไวรัสชนิดรีคอมบิแนนท์ที่มียีนเมลิตตินสามารถกระตุ้นการตายของเซลล์ในเซลล์มะเร็งตับได้อย่างมีประสิทธิภาพ โดยมีอัตราการตายของเซลล์ประมาณ 20% ซึ่งสูงกว่ากลุ่มควบคุมที่ไม่มีอะดีโนไวรัสชนิดรีคอมบิแนนท์และอะดีโนไวรัสชนิดรีคอมบิแนนท์ที่ไม่แปลงสภาพ สิ่งนี้ชี้ให้เห็นว่าการกระตุ้นการตายของเซลล์เนื้องอกก็เป็นหนึ่งในกลไกที่ยีนบำบัดเมลิตตินออกฤทธิ์เช่นกัน

Zhao Yahua และคนอื่นๆ ตั้งใจปรับเปลี่ยนลำดับโครงสร้างปฐมภูมิของกรดอะมิโนในเมลิตตินและการแสดงออกเมลลิตินยีนผ่านการทดลอง พยายามลดปฏิสัมพันธ์ระหว่างเมลิตตินและเยื่อหุ้มสมองจากแบคทีเรีย โดยส่วนใหญ่ผ่านการบุกรุกเมมเบรนในโหมดพรมเพื่อทำให้เกิดการฆ่าเชื้อ ในเวลาเดียวกัน เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงจำนวนประจุและโครงสร้างโมเลกุล ความน่าจะเป็นที่ปฏิกิริยาระหว่างแอมฟิฟิลิกกับเยื่อหุ้มเซลล์เม็ดเลือดจะลดลงอย่างมาก จึงบรรลุเป้าหมายในการยับยั้งภาวะเม็ดเลือดแดงแตก ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกของพิษผึ้งดัดแปลงลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับฤทธิ์ของภาวะเม็ดเลือดแดงแตกของตัวอย่างมาตรฐานประมาณ 14.3 เท่า

เมื่อวันที่ 11 สิงหาคม พ.ศ. 2552 เดลี่เมล์แห่งสหราชอาณาจักรรายงานว่านักวิทยาศาสตร์จากมหาวิทยาลัยวอชิงตันในสหรัฐอเมริกาได้เผยแพร่ผลการวิจัยโดยใช้นาโนเทคโนโลยี พวกเขาได้พัฒนา "ผึ้งนาโน" ที่สามารถมองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เท่านั้น “ผึ้งน้อย” สามารถเจาะเซลล์มะเร็ง ปล่อยเปปไทด์พิษผึ้ง และกำจัดเซลล์มะเร็งทีละเซลล์ ผึ้งน้อยยังมีสารระบุตำแหน่งพิเศษอยู่ข้างใน ซึ่งสามารถนำทางผึ้งไปตลอดทางและไปถึงบริเวณที่ได้รับผลกระทบโดยตรง ในการทดลอง "ผึ้งนาโน" ได้ลดจำนวนเซลล์มะเร็งในหนูที่เป็นมะเร็งเต้านมลง 45% ในขณะที่จำนวนเซลล์มะเร็งในหนูที่เป็นมะเร็งผิวหนังลดลง 75%