ผงอัลฟาอะไมเลสชื่อระบบคือ 1,4- - D-glucan glucan hydrolase หรือที่เรียกว่าอะไมเลสเหลว, เอนไซม์เหลว - 1,4-dextrinase ผงของแข็งสีน้ำตาลเหลืองหรือของเหลวสีเหลืองน้ำตาลถึงน้ำตาลเข้ม มีปริมาณน้ำ 5 เปอร์เซ็นต์ ~ 8 เปอร์เซ็นต์ ละลายได้ในน้ำและสารละลายบัฟเฟอร์เจือจาง แทบไม่ละลายในเอทานอล การวิจัยทางชีวเคมี. สามารถทำให้แป้งกลายเป็นของเหลวได้อย่างรวดเร็วและสร้างน้ำหนักโมเลกุลต่ำ
1. การแปรรูปอาหาร: เป็นสารปรับปรุงที่ปลอดภัยและมีประสิทธิภาพในอุตสาหกรรมแป้งผงอัลฟาอะไมเลสสามารถปรับปรุงคุณภาพของขนมปังได้ อะไมเลสมีการทำให้เป็นของเหลวและกลายเป็นน้ำตาล และมักใช้เป็นสารให้ความหวานในอุตสาหกรรมเครื่องดื่ม ในเครื่องดื่มเย็น ความหนืดของเครื่องดื่มเย็นจะลดลงและมีการไหลเพิ่มขึ้นเพื่อให้แน่ใจว่าเครื่องดื่มเย็นที่มีแป้งสูงจะมีรสชาติ อะไมเลสที่อุณหภูมิสูงซึ่งเป็นสารเตรียมเอนไซม์ที่ทำให้เป็นของเหลวชนิดใหม่ มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในอุตสาหกรรมการหมัก ความคงตัวทางความร้อนถูกกำหนดโดยความคงตัวทางความร้อนของตัวโปรตีนเอง ดังนั้นจึงใช้กันอย่างแพร่หลายในอุตสาหกรรมการผลิตแอลกอฮอล์และเบียร์
2. อุตสาหกรรมอาหารสัตว์: การเพิ่มอะไมเลสจากภายนอกในอาหารสามารถช่วยให้สัตว์เล็กย่อยและใช้แป้งได้ และประสิทธิภาพการเจริญเติบโตและอัตราการเปลี่ยนอาหารของมันมีประโยชน์มาก การเพิ่มการเพาะเลี้ยงเชื้อ Escherichia coli ที่มีชีวิตซึ่งผลิต a-amylase ในอาหารไก่เนื้อสามารถมีบทบาทในการเร่งการเจริญเติบโตของยาปฏิชีวนะ ปรับปรุงสัณฐานวิทยาของลำไส้ และปรับปรุงประสิทธิภาพการผลิต
3. อุตสาหกรรมล้างด้วยน้ำ เนื่องจากแป้งมีราคาถูก หาซื้อง่าย กำจัดออกง่าย จึงใช้เป็นวัสดุป้องกันเส้นด้ายไม่ให้ขาดในกระบวนการผลิตเส้นใยสมัยใหม่ จากนั้นนำไปบำบัดด้วยอะไมเลส ซึ่งสามารถคัดแยกแป้งออกได้ สารละลายโดยไม่ทำลายเส้นใยเส้นด้าย และยังสามารถย่อยสลายแป้งให้เป็นเดกซ์ทรินที่ละลายน้ำได้ ทำให้ล้างออกได้ง่าย
4. อุตสาหกรรมยา: เนื่องจาก Aspergillus niger a-amylase ทนต่อกรด จึงสามารถใช้ในการผลิตยาเพื่อช่วยย่อยอาหาร พัฒนา a-amylase ที่ทนต่อกรดซึ่งเหมาะสำหรับสภาพแวดล้อมที่เป็นกรดในกระเพาะอาหาร และเตรียมสารช่วยย่อยอาหาร
5. อุตสาหกรรมกระดาษ: ส่วนใหญ่จะใช้อะไมเลสเพื่อปรับปรุงความหนืดและความเข้มข้นของแป้งเคลือบกระดาษในอุตสาหกรรมกระดาษ Paste เป็นสารเคลือบกระดาษที่ดี ซึ่งสามารถปรับปรุงความแข็งและความแข็งแรงของกระดาษ และเพิ่มแรงเสียดทานของกระดาษ อย่างไรก็ตาม ความเข้มข้นของแป้งธรรมชาติสูงเกินไปสำหรับกระดาษขนาด ดังนั้นจึงสามารถปรับได้โดยการย่อยสลายแป้งบางส่วนด้วย a-amylase
จากแหล่งที่มาที่แตกต่างกัน - มีความแตกต่างบางประการในคุณสมบัติของอะไมเลส และส่วนใหญ่ใช้เชื้อราและแบคทีเรียในอุตสาหกรรม - อะไมเลส ปัจจุบัน - อะไมเลสถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในอาหารสัตว์ แป้งแปรรูปและน้ำตาลแป้ง อุตสาหกรรมเบเกอรี่ เบียร์ อุตสาหกรรมแอลกอฮอล์ การหมัก สิ่งทอ และอุตสาหกรรมอื่นๆ เป็นเอนไซม์ที่สำคัญทางอุตสาหกรรม
6. การเตรียมเอนไซม์ ผลิตภัณฑ์ที่ทำจาก Aspergillus niger ส่วนใหญ่จะใช้ในแป้งน้ำเชื่อม แอลกอฮอล์ เบียร์ น้ำผลไม้ น้ำเชื่อมช็อกโกแลต ผลิตภัณฑ์ขนมอบ กาแฟเหลว ไวน์ กลูโคส และผลิตภัณฑ์จากนม ทำจาก Aspergillus oryzae ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการเตรียมน้ำเชื่อมแป้ง แอลกอฮอล์ เบียร์ ผลิตภัณฑ์ขนมอบ ผลิตภัณฑ์นม และการทำให้เนื้อนุ่ม ทำจากยีสต์ ส่วนใหญ่ใช้ในการผลิตลูกกวาดและไอศกรีม และการดัดแปลงผลิตภัณฑ์นม ผลิตจากเชื้อรา Trichoderma ส่วนใหญ่ใช้ในการผลิตน้ำผลไม้ ไวน์ น้ำมันพืช และเบียร์ ทำจาก Rhizopus oryzae ส่วนใหญ่ใช้เป็นตัวช่วยในการผลิตน้ำเชื่อมแป้ง การเตรียมน้ำผลไม้ การผลิตชีส และกลูโคส
7. ผลิตภัณฑ์นี้สามารถเร่งปฏิกิริยาไฮโดรไลซิสของแป้งเพื่อผลิตเบียร์ ไวน์ข้าว ซอส โมโนโซเดียมกลูตาเมต และยาปฏิชีวนะ และยังสามารถใช้ในการผลิตกลูโคส มอลโตส และเด็กซ์ตริน ตามข้อบังคับของจีน สามารถใช้ในการผลิตไวน์หมัก ไวน์กลั่น แอลกอฮอล์ และน้ำเชื่อมแป้ง และสามารถใช้ได้อย่างเหมาะสมตามความต้องการในการผลิต
8. แป้งถูกทำให้เป็นของเหลวเป็นเดกซ์ทริน ซึ่งใช้ในการผลิตอาหารสำหรับทารก การแปรรูปธัญพืช การผลิตเบียร์ การแปรรูปน้ำผลไม้ การผลิต Baijiu ฯลฯ เป็นเอนไซม์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายและบริโภคมากที่สุดชนิดหนึ่ง
9. ผงอัลฟาอะไมเลสสามารถไฮโดรไลซ์พันธะกลูโคไซด์ - 1,4-โดยพลการ ตัดเดกซ์ทรินสายสั้นที่มีความยาวต่างกันออกโดยพลการ และน้ำตาลโมเลกุลต่ำจำนวนเล็กน้อย ไดเร็กสตาร์ชและอะมิโลเพคตินถูกย่อยสลายในรูปแบบที่ไม่สม่ำเสมอ เพื่อให้ความหนืด ของแป้งมันลดลงอย่างรวดเร็ว
การเตรียมตัวของผงอัลฟาอะไมเลส:
(1) การเตรียมพาหะ pxmj19-aph213
ขั้นตอนการสร้างเวกเตอร์ pxmj19-aph213 มีดังนี้:
ยีน aph213 ถูกขยายจากเวกเตอร์ xk99e ด้วยไพรเมอร์ aph213F และ aph213R ไพรเมอร์ที่ใช้มีดังนี้
aph213F:ccggatatcagcttcacgctgccgcaagcac
aph213R:ccgaagcttaattctgtttcctgtgtgaaattg
เงื่อนไข PCR มีดังนี้: 95 องศาเป็นเวลา 4 นาที; 95 องศา 30 วินาที, 62 องศา 30 วินาที, 72 องศา 1 นาที, 35 รอบ; 72 องศา 7นาที
การออกแบบไพรเมอร์ข้างต้นทำให้เกิดจุดพัก EcoRV ที่ต้นทางของยีน aph213 และจุดพัก HindIII ที่ปลายน้ำระหว่างการขยายของยีน aph213 ลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีน aph213 แสดงไว้ใน SEQ ID NO: 4; ผลิตภัณฑ์ PCR ได้รับการกู้คืนและย่อยด้วย EcoRV และ HindIII จากนั้นเชื่อมต่อกับเวกเตอร์ pxmj-19 ซึ่งถูกแยกย่อยด้วย EcoRV และ HindIII ผ่าน T4DNA ligase เพื่อให้ได้เวกเตอร์ pxmj19-aph213
ขั้นตอนการขยายสัญญาณของเวกเตอร์ pxmj19-aph213 มีดังนี้:
A. เติมอาหารเลี้ยงเชื้อ LB 3 มล. และยาปฏิชีวนะคลอแรมเฟนิคอล 34 มก./มล. 1.5ul ลงในหลอดปั่นแยกขนาด 50 มล.
B. เลือก Escherichia coli DH5 ด้วยเวกเตอร์ pxmj19-aph213 ถ่ายโอนไปยังอาหารเลี้ยงเชื้อข้างต้นที่อุณหภูมิ 37 องศาและ 230 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 12 ชั่วโมงเพื่อขยายพลาสมิด pxmj19-aph213
C. แยกพลาสมิด pxmj19-aph213 ตามคำแนะนำของชุดแยกพลาสมิด
(2) Bacillus subtilis - การขยายและดัดแปลงยีนอะไมเลส
ขยายจากจีโนม Bacillus subtilis ด้วยไพรเมอร์ AmyF และ AmyR - ไพรเมอร์ที่ใช้สำหรับยีนอะไมเลสมีดังนี้:
AmyR:ccgctcgagtcagtggtggtggtggtggtgatgggggaagagaaccgcttaag;
AmyF:ccgaagcttgaaaggaggacctaatgtttgcaaaacgattcaaaacc;
เงื่อนไข PCR มีดังนี้: 95 องศาเป็นเวลา 4 นาที; 95 องศา 30 วินาที 62 องศา 30 วินาที 72 องศา 2 นาที 35 รอบ; 72 องศา 7นาที
การออกแบบไพรเมอร์ข้างต้นทำให้ - ในระหว่างการขยายของยีนอะไมเลส - ลำดับ e3 SD ถูกสร้างขึ้นที่ต้นน้ำของยีนอะไมเลสและแท็กฮิสทิดีนจะเกิดขึ้นที่ปลายน้ำ ไซต์เอ็นโดนิวคลีเอสที่มีข้อจำกัดต้นน้ำคือ HindIII และไซต์เอนโดนิวคลีเอสที่มีข้อจำกัดดาวน์สตรีมคือ XhoI;
(3) การสร้างเวกเตอร์รีคอมบิแนนท์
ผลิตภัณฑ์ PCR ได้รับการกู้คืนและย่อยด้วย XhoI และ HindIII จากนั้นเชื่อมต่อกับเวกเตอร์ pxmj19-aph213 ซึ่งถูกย่อยด้วย XhoI และ HindIII ผ่าน T4 DNA ligase เพื่อให้ได้เวกเตอร์ pxmj ที่มีการแสดงออกแบบรีคอมบิแนนท์19-aph 213-เอมี่
(4) การสร้างแบคทีเรียรีคอมบิแนนท์
เวกเตอร์นิพจน์รีคอมบิแนนต์ pxmj19-aph213-amy ถูกถ่ายโอนไปยัง Escherichia coli เพื่อการขยายสัญญาณล่วงหน้า อาหารเลี้ยงเชื้อคืออาหารเลี้ยงเชื้อ LB และความเข้มข้นของคลอแรมเฟนิคอลเท่ากับ 50 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร หลังจากการสกัด มันถูกถ่ายโอนเข้าสู่ Corynebacterium glutamicum โดยวิธีการเปลี่ยนรูปด้วยไฟฟ้า และเลี้ยงใน LBHIS recovery medium ที่อุณหภูมิ 30 องศา ด้วยความเข้มข้นของคลอแรมเฟนิคอล 30 มก./มล.
(5) เพาะเชื้อ recombinant และหลั่งการแสดงออก - อะไมเลส
ย้ายทรานส์ฟอร์เมอร์สที่โตแล้วไปยังขวดรูปสามเหลี่ยมขนาด 250 มล. ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเชื้อ 50 มล. สื่อคือสื่อ BHI สภาวะการเพาะคือ 30 องศา 230 รอบต่อนาที 48 ชม.
（6） ผงอัลฟาอะไมเลสของอะไมเลส
ก. ปั่นแยกแบคทีเรียรีคอมบิแนนท์ที่ความเร็ว 12,000 รอบต่อนาที 4 องศา 5 นาที เพื่อให้ได้ - ส่วนเหนือตะกอนของอะไมเลส
B. จะมี - ส่วนเหนือของอะไมเลสอยู่ภายใต้การควบคุมด้วยโครมาโตกราฟีแบบสัมพรรคภาพ ขั้นแรก ให้ปรับสมดุลของคอลัมน์นิกเกิลด้วยบัฟเฟอร์ A - ส่วนเกินของอะไมเลสถูกกรองและโหลดไปยังคอลัมน์นิกเกิลที่สมดุล จากนั้นปริมาตรของสามคอลัมน์จะถูกทำให้สมดุลเพิ่มเติมด้วยบัฟเฟอร์ A จนถึงระดับพื้นฐาน ชะด้วยสารละลาย B 100 มิลลิโมล รวบรวมส่วนที่ชะออกมา และรวบรวม 0.5 มล. ต่อหลอด
บัฟเฟอร์ A: 300mM NaCl, 20mM Tris, บัฟเฟอร์ pH8.0; บัฟเฟอร์ B: NaCl 300mM, อิมิดาโซล 250mM, Tris 20mM, บัฟเฟอร์ pH8.0
C. สำหรับสารที่มี - อะไมเลสที่ชะออกจะถูกแยกเกลือออกผ่านคอลัมน์แยกเกลือเพื่อให้ได้สารละลายอะไมเลสที่บริสุทธิ์ ซึ่งเก็บไว้ที่ - 20 องศา ;
บัฟเฟอร์ที่ใช้สำหรับการแยกเกลือออกคือบัฟเฟอร์ PBS 50mM ที่ pH 7.0
ป้ายกำกับยอดนิยม: alpha-amylase powder cas 9000-90-2, ซัพพลายเออร์, ผู้ผลิต, โรงงาน, ขายส่ง, ซื้อ, ราคา, จำนวนมาก, ขาย