ส่วนผสมที่ใช้งานหลักของการฉีด AICAR คือ AICAR (5- aminoimidazole -4- formamide ribonucleoside, สูตรเคมีc₉h₁₄n₄o₅) ซึ่งเป็นของ purine nucleoside analogues {. มันมีคุณสมบัติการละลายต่อไปนี้:
Water solubility: >7 มก./มล. (ที่อุณหภูมิห้อง)
ความสามารถในการละลายของตัวทำละลายอินทรีย์: DMSO (20 มก./มล.), เมทานอล (10 มก./มล.), เอทานอล (1 มก./มล.), dimethylformamide
ความสามารถในการละลาย PBS: ประมาณ 0.3 มก./มล.
ความเสถียรทางเคมีของ AICAR ได้รับผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญจากอุณหภูมิ:
วิธีแก้ปัญหาทางน้ำ: ขอแนะนำให้ใช้ทันทีหลังจากเตรียมการเพื่อหลีกเลี่ยงการเสื่อมสภาพ .
การจัดเก็บของตัวทำละลายอินทรีย์: โซลูชันที่เตรียมด้วย DMSO สามารถเก็บไว้ที่ -20 ปริญญาได้นานถึง 3 เดือนและสถานะผงสามารถเก็บไว้ได้ที่ -20 ระดับ 2 ปี .}
 |
 |
|
|
CoA ผง AICAR
องค์ประกอบหลักของการฉีด AICARคือ AICAR (5- aminoimidazole -4- formamide ribonucleoside) และกระบวนการผลิตจะต้องปฏิบัติตามข้อกำหนดของ GMP อย่างเคร่งครัด
การควบคุมวัตถุดิบและการปรับสภาพ
ส่วนผสมยาที่ใช้งานของ AICAR จะต้องซื้อจากซัพพลายเออร์ที่ตรงตามมาตรฐานโดยต้องมีความบริสุทธิ์มากกว่า 98% (ทดสอบโดย HPLC) และต้องให้ COA (รายงานการวิเคราะห์ที่สมบูรณ์) รวมถึงข้อมูลสำคัญเช่นหมายเลข CAS (2627-69-2), สูตรโมเลกุล (C₉n₄o₅) ส่วนผสมยาที่ใช้งานควรเก็บไว้จากแสงที่ -20 ระดับเพื่อป้องกันการย่อยสลาย . ในระหว่างขั้นตอนการปรับสภาพส่วนผสมยาที่ใช้งานอยู่ (API) จะต้องถูกบดขยี้ ดำเนินการ (หากจำเป็นต้องมีการเตรียมการฆ่าเชื้อเอนโดท็อกซินควรถูกควบคุมให้น้อยกว่า 0.25eu/mg)
การเพิ่มประสิทธิภาพของกระบวนการสูตร
การปรับปรุงการละลาย
ความสามารถในการละลายของ AICAR ในน้ำคือ 65 มก./มล. (ต้องการความช่วยเหลืออัลตราโซนิกและความร้อนสำหรับการละลาย) และใน DMSO มันมีค่ามากกว่าหรือเท่ากับ 50 มก./มล. . เพื่อเพิ่มความสามารถในการดูดซึมทางชีวภาพ
เทคโนโลยีนาโนผลึก:AICAR มีระดับ micronized ถึงระดับนาโนเมตร (ขนาดอนุภาค<400nm) through a high-pressure homogenizer, and then combined with stabilizers such as poloxam 188 to prepare a suspension.
ระบบตัวทำละลายแฝง:มีการใช้ตัวทำละลายผสมของ PEG400 และเอทานอลซึ่งเพิ่มความสามารถในการละลายของ AICAR . อย่างมีนัยสำคัญอย่างไรก็ตามสัดส่วนของตัวทำละลายอินทรีย์ (โดยปกติ<5%) needs to be controlled to avoid vascular irritation.
การเตรียมการปลอดเชื้อ
น้ำสำหรับฉีด:หลังจากชั่งน้ำหนัก API แล้วมันจะถูกเพิ่มเข้าไปในถังเตรียมเข้มข้นและกวนด้วยน้ำอย่างเต็มที่สำหรับการฉีด . วัสดุที่เปิดใช้งานคาร์บอนที่ใช้สำหรับการดูดซับและ decolorization .} ผ่านการฆ่าเชื้อและกรองโดย 0 . 22 μ m เมมเบรนตัวกรอง microporous . มันถูกเติมลงในขวด ampoule และฆ่าเชื้อด้วยไอน้ำร้อน 121 องศาเป็นเวลา 10 นาที . หลังจากเย็นลงอย่างรวดเร็วในอ่างน้ำแข็ง
การเตรียมเข็มฉีดยาที่เติมล่วงหน้า:มีการใช้เข็มฉีดยาที่เต็มไปด้วยการใช้งานและกระบวนการของการแกะการเติมการเติมการปรับและการตรวจสอบแสงจะเสร็จสมบูรณ์ภายใต้การป้องกันการไหลแบบลามินาร์ระดับ A . เงื่อนไขการทำหมันจะต้องควบคุมสมดุลความแตกต่างของแรงดันภายในและภายนอกผลิตภัณฑ์เพื่อป้องกันความเสียหาย
ระบบประกันแบบปลอดเชื้อ
การออกแบบพื้นที่สะอาด:การประชุมเชิงปฏิบัติการการผลิตควรแบ่งออกเป็นสี่ระดับที่สะอาด ได้แก่ A, B, C และ D ตามข้อกำหนด GMP . ในหมู่พวกเขากระบวนการสำคัญเช่นการเติมและการตัดควรดำเนินการภายใต้การป้องกันการไหลของลามินาร์ ได้รับการทำความสะอาดภายนอกบัฟเฟอร์ฆ่าเชื้อหรือฆ่าเชื้อก่อนเข้าสู่พื้นที่สะอาด .
การตรวจสอบด้านสิ่งแวดล้อม:ในระหว่างกระบวนการผลิตของแต่ละชุดผลิตภัณฑ์พื้นที่สะอาดจะต้องได้รับการตรวจสอบสำหรับแบคทีเรียที่ถูกตัดสินแบคทีเรียในอากาศอนุภาคแขวนลอยและจุลินทรีย์บนพื้นผิวของบุคลากรและอุปกรณ์เพื่อให้แน่ใจว่าสภาพแวดล้อมเป็นไปตามมาตรฐาน .}}
การควบคุมคุณภาพและการวิจัยความมั่นคง
รายการควบคุมคุณภาพ
รวมถึงคุณสมบัติทางกายภาพ (สีขาวถึงผงสีขาวหรือช่วงล่าง), การระบุ (วิธี HPLC หรือวิธี UV), การกำหนดเนื้อหา (วิธี HPLC, เนื้อหาควรเป็น 90 . 0%-110.0%ของปริมาณที่ติดฉลาก)
การศึกษาความมั่นคง
ความเสถียรในระยะยาว (25 องศา± 2 องศา /60%± 5%RH, 12 เดือน) และความเสถียรเร่ง (40 องศา± 2 องศา /75%± 5%RH, 6 เดือน) จำเป็นต้องได้รับการตรวจสอบโดยมุ่งเน้นเนื้อหาที่เกี่ยวข้องและการเปลี่ยนแปลงค่า pH . ศักยภาพ .
เงื่อนไขการจัดเก็บ
ข้อมูลจำเพาะการจัดเก็บขั้นพื้นฐาน: การควบคุมอุณหภูมิและเวลาสองครั้ง
จัดเก็บในรูปแบบผง
ความเสถียรของผง AICAR ได้รับผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญจากอุณหภูมิและข้อกำหนดต่อไปนี้จะต้องปฏิบัติตามอย่างเคร่งครัด:
-20 องศา: สามารถเก็บไว้ได้ 3 ปีซึ่งเป็นเงื่อนไขที่ต้องการสำหรับการจัดเก็บระยะยาว .}
4 องศา: อายุการเก็บรักษาสั้นลงถึง 2 ปีทำให้เหมาะสำหรับการทดลองระยะสั้นหรือสถานการณ์การเข้าถึงบ่อยครั้ง .}
พื้นฐานทางวิทยาศาสตร์: สภาพแวดล้อมที่อุณหภูมิต่ำสามารถยับยั้งการเคลื่อนที่ด้วยความร้อนของโมเลกุลและลดอัตราการย่อยสลายปฏิกิริยา . ที่ -20 ระดับความเสถียรของพันธะอะไมด์ 90%.
การจัดเก็บในสถานะการแก้ปัญหา
ควรเลือกเงื่อนไขการจัดเก็บข้อมูลสำหรับ AICAR ที่ละลายตามประเภทของตัวทำละลาย
-80 องศา: สามารถเก็บไว้ได้ 6 เดือนในตัวทำละลายเช่น DMSO และ PBS ซึ่งเหมาะสำหรับการสำรองโครงการระยะยาว .}
-20 องศา: อายุการเก็บรักษาสั้นลงถึง 1 เดือนและควรให้ความสำคัญกับการทดลองล่าสุด .
ข้อกำหนดพิเศษสำหรับการแก้ปัญหา DMSO: หลังจากการเตรียมการแล้วสามารถเก็บไว้ที่ -20 ปริญญาได้นานถึง 3 เดือน แต่ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งซ้ำ ๆ และการละลายซ้ำ .}
จุดสำคัญของการดำเนินงาน: หลังจากการแก้ปัญหานั้นถูกจัดให้มีการจัดเก็บไว้ในการแช่แข็งที่ปิดผนึกอย่างดีและทำเครื่องหมายด้วยวันที่เตรียมและความเข้มข้น . วัฏจักรแช่แข็ง-ละลายสามารถทำให้เกิดความผันผวนของค่า pH ของการแก้ปัญหา ส่วนผสม .
กลยุทธ์การเพิ่มประสิทธิภาพการละลาย: การเลือกตัวทำละลายและเทคนิคการเตรียมการ
การเตรียมสารละลายน้ำ
ความสามารถในการละลายของ AICAR ในน้ำคือ 65 มก./มล. (251 . 71 มม.) แต่ต้องการความช่วยเหลือจากอัลตร้าซาวด์และความร้อน ข้อกำหนดการดำเนินงาน
ชั่งน้ำหนักผง AICAR ในปริมาณที่เหมาะสมและเพิ่มลงในน้ำที่ปราศจากไอออนที่อุ่น .
การรักษาด้วยอัลตราโซนิกเป็นเวลา 5 ถึง 10 นาที (พลังงานน้อยกว่าหรือเท่ากับ 200W) ในระหว่างที่สังเกตความชัดเจนของสารละลาย .}
ใช้ทันทีหลังจากเตรียมการเพื่อหลีกเลี่ยงการเสื่อมสภาพเนื่องจากที่เก็บข้อมูลเป็นเวลานาน .
พื้นฐานทางวิทยาศาสตร์: การรักษาด้วยคลื่นเสียงความถี่สูงสามารถขัดขวางเครือข่ายพันธะไฮโดรเจนระหว่างโมเลกุล AICAR และเพิ่มอัตราการละลาย . การให้ความร้อนเป็น {40-50 ระดับสามารถเพิ่มพลังงานจลน์ของโมเลกุลของตัวทำละลายและส่งเสริมการแพร่กระจายของตัวละลาย .}}}
การเตรียมตัวทำละลายอินทรีย์
DMSO เป็นตัวทำละลายอินทรีย์ที่ต้องการสำหรับ AICAR โดยมีความสามารถในการละลายมากกว่าหรือเท่ากับ 50 มก./มล. (193 . 63 มม.) แผนการเตรียมการ
การเตรียมสารละลายสต็อก: ละลาย AICAR 1 มก. ใน DMSO 3.8725 มล. เพื่อเตรียมสารละลาย 1 มม.
การเตรียมโซลูชันการทำงาน: ใช้สารละลายสต็อกในปริมาณที่เหมาะสมและเจือจางไปยังความเข้มข้นของเป้าหมายด้วย PBS หรือสื่อการเพาะเลี้ยง .
การรวมกันของ Cosolvent: สำหรับตัวอย่างที่ละลายได้ไม่ดีตัวทำละลายผสม 10% dmso + 40% peg 300 + 5% tween -80 + 45% น้ำเกลือสามารถใช้เพื่อเพิ่มความสามารถในการละลายมากกว่าหรือเท่ากับ 2 . 08 mg/m
จุดสำคัญของการดำเนินงาน: ควรเตรียมตัวทำละลายอินทรีย์และใช้ทันทีเพื่อหลีกเลี่ยงการผสมโดยตรงกับสารละลายน้ำซึ่งอาจทำให้เกิดการตกตะกอน . ความเข้มข้นของ DMSO เกิน 10% อาจส่งผลกระทบต่อกิจกรรมของเซลล์และสัดส่วนจะต้องปรับให้เหมาะสมผ่านการทดลองล่วงหน้า
บรรทัดฐานการจัดเก็บสำหรับสถานการณ์แอปพลิเคชัน: การจัดการที่แตกต่างจากการทดลองเซลล์ไปจนถึงแบบจำลองสัตว์
การจัดเก็บการทดลองเซลล์
การใช้งานระยะสั้น: โซลูชันการทำงานของ AICAR ที่เตรียมไว้สามารถเก็บไว้ที่ 4 องศาสำหรับ 24-48 ชั่วโมงและควรปิดผนึกและป้องกันจากแสง .
การจัดเก็บระยะยาว: aliquot และเก็บที่ -80 องศาหลีกเลี่ยงการแช่แข็งซ้ำ ๆ และละลาย .}
การควบคุมคุณภาพ: ก่อนการใช้งานแต่ละครั้งค่า pH (ซึ่งควรเป็น 6.5-7.5) และความชัดเจนของการแก้ปัญหาควรได้รับการทดสอบ . หากพบความผิดปกติใด ๆ จะต้องมีการสำรอง .}
พื้นฐานทางวิทยาศาสตร์: การทดลองเซลล์มีความไวสูงต่อความเข้มข้นของ AICAR . ความผันผวนของความเข้มข้นมากกว่า 5% อาจส่งผลกระทบต่อความสามารถในการทำซ้ำของผลการทดลอง .}
การเก็บรักษาสัตว์ทดลอง
การเตรียมการฉีด: ใช้ตัวทำละลายผสม 10% DMSO + 90% น้ำมันข้าวโพดโดยมีความสามารถในการละลายมากกว่าหรือเท่ากับ 2.08 mg/ml;
เงื่อนไขการจัดเก็บ: จัดเก็บที่ 4 องศาไม่เกิน 7 วันและที่ -20 องศาไม่เกิน 1 เดือนหลังจากการเตรียม .
การรักษาล่วงหน้าก่อนการบริหาร: ก่อนการฉีดอุณหภูมิควรถูกนำกลับไปที่อุณหภูมิห้องเพื่อหลีกเลี่ยงการกระตุ้นอุณหภูมิต่ำทำให้เกิดการตอบสนองต่อความเครียดในสัตว์ .}
จุดสำคัญของการดำเนินงาน: ในการทดลองสัตว์ปริมาณและความถี่ของการบริหารจะต้องถูกควบคุมอย่างเคร่งครัด . ครึ่งชีวิตของ AICAR คือประมาณ 2 ถึง 4 ชั่วโมง . แนะนำให้จัดการยา 2 ถึง 3 ครั้งต่อวันเพื่อรักษาความเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพ
การตรวจสอบความเสถียรและการควบคุมความเสี่ยง: การจัดการแบบวงปิดจากทฤษฎีสู่การปฏิบัติ
ตัวบ่งชี้การตรวจสอบความมั่นคง
ความเสถียรทางเคมี:ตรวจพบการเปลี่ยนแปลงพื้นที่สูงสุดของ AICAR โดย HPLC . อัตราส่วนพื้นที่สูงสุดของผลิตภัณฑ์การย่อยสลายน้อยกว่าหรือเท่ากับ 5% ถือว่ามีคุณสมบัติ .}
กิจกรรมทางชีวภาพ:กิจกรรมได้รับการตรวจสอบโดยการตรวจจับระดับฟอสโฟรีเลชั่นของ AMPK . กิจกรรมสัมพัทธ์มากกว่าหรือเท่ากับ 90% ถือว่ามีคุณสมบัติ .}
ความมั่นคงทางกายภาพ:สังเกตการเปลี่ยนแปลงความชัดเจนและสีของการแก้ปัญหา . หากมีความผิดปกติเกิดขึ้นให้หยุดใช้ทันที .
การตรวจสอบความถี่:ผงได้รับการทดสอบทุก ๆ หกเดือนและทำการทดสอบวิธีแก้ปัญหาก่อนที่จะใช้ชุดแต่ละชุด .
กลยุทธ์การควบคุมความเสี่ยง
การจัดการอุณหภูมินอกการควบคุม:หากอุณหภูมิการจัดเก็บเกินกว่า -20 องศานานกว่า 24 ชั่วโมงความเสถียรจะต้องถูกทดสอบซ้ำ .}
การจัดการแช่แข็งซ้ำ ๆ ซ้ำ ๆ :สร้างระบบการลงทะเบียนสำหรับการใช้ cryotubes เพื่อป้องกันไม่ให้หลอดสารละลายเดียวกันถูกแช่แข็งและละลายมากกว่าสามครั้ง .
แผนการตอบสนองฉุกเฉิน:ติดตั้งด้วยการสำรองข้อมูล -80 ระดับตู้เย็น {. ถ่ายโอนตัวอย่างทันทีเมื่อตู้เย็นความผิดปกติ .
ป้ายกำกับยอดนิยม: การฉีด AICAR, ซัพพลายเออร์, ผู้ผลิต, โรงงาน, ขายส่ง, ซื้อ, ราคา, ราคา, จำนวนมาก, ขาย