ผงไอพีทีจีสามารถใช้สำหรับการฉีดยาชาเฉพาะที่ โดยใช้เป็นสารแพร่กระจายเพื่อ-บรรเทาอาการปวดบาดแผลและอาการปวดแผลหลังการผ่าตัด รีเอเจนต์ทางชีวภาพระดับโมเลกุลที่ใช้กันทั่วไปในการตรวจคัดกรองจุดสีน้ำเงินและสีขาว และการแสดงออกของโปรตีนที่เหนี่ยวนำให้เกิด IPTG ในแบคทีเรีย IPTG ชื่อเต็ม isopropyl- - D-thiogalactoside, CAS 367-93-1, สูตรโมเลกุล C9H18O5S, น้ำหนักโมเลกุล 384.37 Daltons เป็นของสารประกอบโมเลกุลขนาดเล็ก ผงสีขาวหรือเกือบขาว มีความสามารถในการละลายน้ำต่ำแต่สามารถละลายได้ดีขึ้นในตัวทำละลายอินทรีย์ มีหมู่ไอออนิกอยู่ในโมเลกุล จึงมีการนำไฟฟ้าในระดับหนึ่งในน้ำ มีความเสถียรที่อุณหภูมิห้อง แต่สลายตัวได้ง่ายภายใต้อุณหภูมิสูงหรือสภาวะกรดและด่างแก่ ไม่มีกลิ่นที่ชัดเจน แต่อาจมีกลิ่นสารประกอบอินทรีย์เล็กน้อยในระหว่างการใช้งาน เป็นตัวเหนี่ยวนำที่ใช้กันทั่วไปเพื่อกระตุ้นการแสดงออกของโปรตีนในแบคทีเรีย ในการวินิจฉัยทางการแพทย์ IPTG สามารถทำหน้าที่เป็นหัววัดเรืองแสงหรือสารโครโมเจนิกสำหรับการตรวจจับโมเลกุลหรือเนื้อเยื่อจำเพาะในตัวอย่าง ด้วยการรวมเข้ากับโมเลกุลเป้าหมาย IPTG สามารถสร้างสัญญาณฟลูออเรสเซนต์หรือการเปลี่ยนสีได้ ซึ่งให้การสนับสนุนอย่างมากต่อการวินิจฉัยโรค

|
สัณฐานวิทยา |
ผงคริสตัลลีน |
|
สี |
สีขาว |
|
จุดหลอมเหลว |
105 องศาเซลเซียส |
|
จุดเดือด |
350.9 องศา C (ประมาณคร่าวๆ) |
|
ความหนาแน่น |
1.3329 (ประมาณการคร่าวๆ) |
|
สภาพการเก็บรักษา |
2-8 องศาเซลเซียส |
|
ความสามารถในการละลายแอลกอฮอล์ |
ตัวทำละลายที่ละลายน้ำได้ 40 ส่วน |
|
ค่าสัมประสิทธิ์ความเป็นกรด (pKa) |
13.00 ± 0.70 ( คาดการณ์ ) |
|
ละลายได้ในน้ำ |
50มก./มล |
|
จุดวาบไฟ |
197.8 องศา |
|
ความสามารถในการละลาย |
1.6g/l |
|
ความหนาแน่นของไอ |
5.21 (เทียบกับอากาศ) |
|
ดัชนีการหักเหของแสง |
1.5060 (ประมาณ) |
|
|
|
ผงไอพีทีจี,พารามิเตอร์ทางกายภาพ MP : 114 ~ 121 องศา C , คำอธิบายการใช้งาน, รีเอเจนต์ทางอณูชีววิทยาทั่วไป ที่ใช้กันทั่วไปในการคัดกรองสีขาวสีน้ำเงิน- และ IPTG - กระตุ้นการแสดงออกของโปรตีนในแบคทีเรีย , ข้อกำหนดบรรจุภัณฑ์ , 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG , สภาพการเก็บรักษา
ตู้เย็นอุณหภูมิ 2-8 องศา ป้องกันแสง , คำอธิบายอันตราย , รหัสอันตราย : Xi , ระดับความเสี่ยง : R36 / 37 / 38 , ระดับความปลอดภัย : S23-24 / 25-36.
โดยทั่วไป IPTG จะใช้ในการทดลองโคลนนิ่งที่ต้องกระตุ้น -กิจกรรมกาแลคโตซิเดส มักจะใช้ร่วมกับ X-Gal หรือ Bluo-Gal สำหรับการคัดกรองสีน้ำเงิน-สีขาวของโคโลนีแบคทีเรียลูกผสม ซึ่งสามารถกระตุ้นโดย Chemicalbook ให้แสดงออก lac operon ใน E. coli IPTG จับกับโปรตีนกด lacI และเปลี่ยนโครงสร้างเพื่อป้องกันการยับยั้งยีน lacZ ที่เข้ารหัสโดย -galactosidase

IPTG มีชื่อเต็มว่า isopropyl- -D-thiogalactoside เป็นตัวเหนี่ยวนำที่ใช้กันทั่วไปซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการกระตุ้นและควบคุมการแสดงออกของโปรตีน เนื่องจากโครงสร้างและฟังก์ชันที่เป็นเอกลักษณ์ IPTG จึงมักจะเตรียมการใช้ผงไอพีทีจีวิธีการสังเคราะห์ในห้องปฏิบัติการ
เส้นทางสังเคราะห์
1. การสังเคราะห์ไกลโคไซด์:
การสังเคราะห์ครั้งแรก -D-ไทโอกาแลคโตไซด์มักถูกสังเคราะห์โดยวิธีการสังเคราะห์ไกลโคไซด์ โดยการควบแน่นกาแลคโตสด้วยเบสที่สอดคล้องกัน (เช่น ไอโซโพรพิล) ขั้นตอนนี้จำเป็นต้องใช้กลุ่มป้องกันเพื่อหลีกเลี่ยงการสร้างผลพลอยได้-ในปฏิกิริยาที่ตามมา
2. ปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชั่น:
บนพื้นฐานของการสังเคราะห์ไกลโคไซด์ หมู่ฟอสเฟตจะถูกแนะนำผ่านปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชั่น เพื่อให้ได้หมู่ไอโซโพรพิล- -D-ไทโอแลคโตไซด์-5'-ฟอสเฟตเอสเทอร์ ขั้นตอนนี้ต้องใช้ฟอสเฟตและแอนไฮไดรด์หรือกรดที่เกี่ยวข้อง
3. กลุ่มการปลดการป้องกัน:
โดยปฏิกิริยาของกลุ่มที่มีการป้องกัน กลุ่มป้องกันในไกลโคไซด์จะถูกกำจัดออกเพื่อให้ได้ไอโซโพรพิล- - D-ไทโอกาแลกโตไซด์ที่เป็นผลิตภัณฑ์เป้าหมาย ขั้นตอนนี้ต้องใช้สารละลายกรดหรือด่างเพื่อช่วยในการทำปฏิกิริยา

ขั้นตอนการทดลอง:
เตรียมรีเอเจนต์และเครื่องมือ:
เตรียมน้ำตาล เบส หมู่ป้องกัน ฟอสเฟต แอนไฮไดรด์หรือกรด ตัวทำละลาย และรีเอเจนต์อื่นๆ ที่จำเป็น รวมถึงเครื่องมือทดลองที่จำเป็น เช่น เครื่องกวน เทอร์โมมิเตอร์ สเปกโตรโฟโตมิเตอร์ ฯลฯ
การสังเคราะห์ไกลโคไซด์:
ให้ความร้อนและกวนกาแลคโตสด้วยเบสที่สอดคล้องกันในตัวทำละลาย เติมตัวเร่งปฏิกิริยา และส่งเสริมปฏิกิริยาการควบแน่น ขั้นตอนนี้จำเป็นต้องควบคุมอุณหภูมิและเวลาในการกวนอย่างเข้มงวดเพื่อให้แน่ใจว่าปฏิกิริยาจะดำเนินไปอย่างราบรื่น
ปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชั่น:
ไกลโคไซด์ที่สังเคราะห์ขึ้นจะถูกให้ความร้อนและกวนกับฟอสเฟต แอนไฮไดรด์ หรือกรดในตัวทำละลาย และเติมตัวเร่งปฏิกิริยาเพื่อส่งเสริมปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชั่น ขั้นตอนนี้จำเป็นต้องควบคุมอุณหภูมิและเวลาในการกวน ในขณะเดียวกันก็ให้ความสนใจกับขั้วและปริมาณของตัวทำละลายเพื่อให้แน่ใจว่าปฏิกิริยาและการสร้างผลิตภัณฑ์มีความคืบหน้า
กลุ่มการป้องกัน:
นำกลุ่มป้องกันออกจากผลิตภัณฑ์ฟอสโฟรีเลชั่นในสารละลายกรดหรือด่างเพื่อให้ได้ผลิตภัณฑ์เป้าหมายไอโซโพรพิล- - D-ไทโอแลคโตไซด์ ขั้นตอนนี้จำเป็นต้องควบคุมค่า pH และอุณหภูมิ ขณะเดียวกันก็ให้ความสนใจกับขั้วและปริมาณของตัวทำละลาย เพื่อให้มั่นใจถึงความคืบหน้าของปฏิกิริยาและการสร้างผลิตภัณฑ์
การแยกและการทำให้บริสุทธิ์:
ผลิตภัณฑ์เป้าหมายจะถูกแยกออกจากของผสมปฏิกิริยาผ่านคอลัมน์โครมาโทกราฟี การตกผลึกซ้ำ และวิธีการแยกและการทำให้บริสุทธิ์อื่นๆ ขั้นตอนนี้ต้องให้ความสนใจกับสภาวะการทำงาน เช่น อุณหภูมิ ปริมาณตัวทำละลาย อัตราการไหล ฯลฯ เพื่อให้มั่นใจในความบริสุทธิ์และผลผลิตของผลิตภัณฑ์
การวิเคราะห์และการระบุ:
การระบุโครงสร้างของผลิตภัณฑ์เป้าหมายดำเนินการผ่านวิธีการวิเคราะห์ เช่น เรโซแนนซ์แม่เหล็กนิวเคลียร์ และแมสสเปกโตรเมทรี ขั้นตอนนี้ต้องใช้เครื่องมือ อุปกรณ์ และวิธีการทางเทคนิคที่เกี่ยวข้องเพื่อยืนยันโครงสร้างและความบริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์

ผงไอพีทีจีชื่อเต็ม isopropyl- - D-thiogalactoside เป็นตัวเหนี่ยวนำที่ใช้กันทั่วไป ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการกระตุ้นและควบคุมการแสดงออกของโปรตีน
1. การเหนี่ยวนำการแสดงออกของโปรตีน:
IPTG มีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นการแสดงออกของโปรตีน เป็นตัวเหนี่ยวนำที่ใช้กันอย่างแพร่หลายซึ่งสามารถกระตุ้นการแสดงออกของยีนจำเพาะในแบคทีเรียได้อย่างมีประสิทธิภาพ ทำให้ได้โปรตีนเป้าหมายที่ต้องการในระยะเวลาอันสั้น กลไกการออกฤทธิ์คือการจับกับยีน lacI ของแบคทีเรีย ยับยั้งการทำงานของโปรตีนควบคุมการถอดรหัส ซึ่งจะเปิด lac operon ของแบคทีเรียและเริ่มการแสดงออกของยีนเป้าหมาย เมื่อใช้แลคโตสโอเปอรอนเป็นโปรโมเตอร์สำหรับการแสดงออกของโปรตีน จำเป็นต้องใช้ตัวเหนี่ยวนำ และ IPTG สามารถทำหน้าที่เป็นอะนาล็อกแลคโตสเพื่อกระตุ้นการแสดงออกของกาแลคโตซิเดสใน Escherichia coli เซลล์ไม่สามารถใช้เพื่อให้เกิดการแสดงออกอย่างยั่งยืน IPTG เชื่อมโยงกับ lac|ผลิตภัณฑ์ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างห่างจาก lacO ดังนั้นจึงเปิดใช้งานการถอดรหัส ระเบียบการถอดเสียงที่เหนี่ยวนำไม่ได้นี้ได้กลายเป็นองค์ประกอบที่ใช้กันทั่วไปในการสร้างเวกเตอร์ระบบการแสดงออกของ E. coli
2. การควบคุมการแสดงออกของยีน:
IPTG มีบทบาทสำคัญในการควบคุมการแสดงออกของยีน เนื่องจากเป็นรีเอเจนต์ในการทดลองที่สำคัญ จึงมีบทบาทสำคัญในการควบคุมการแสดงออกของยีนและการทดลองการแสดงออกของโปรตีนมากเกินไป ด้วยการควบคุมเวลาเติมและความเข้มข้นของ IPTG จึงสามารถบรรลุการควบคุมการแสดงออกของโปรตีนเป้าหมายได้ ผลกระทบด้านกฎระเบียบนี้ขึ้นอยู่กับการเชื่อมโยงของ IPTG กับ lac|ผลิตภัณฑ์ในแลคโตสโอเปอเรเตอร์ เปลี่ยนแปลงโครงสร้าง จึงทิ้ง lacO และเปิดใช้งานการถอดรหัสต่อไป กลไกการควบคุมการถอดเสียงที่เหนี่ยวนำได้นี้ทำให้ IPTG มีความสำคัญอย่างยิ่งในสาขาการวิจัย เช่น การทำงานของยีน ปฏิกิริยาระหว่างโปรตีน และการคัดกรองยา
3. การตกผลึกของโปรตีน:
ในการทดลองการตกผลึกโปรตีน IPTG ถูกใช้เป็นตัวเหนี่ยวนำเพื่อส่งเสริมการตกผลึกของโปรตีน กลไกการออกฤทธิ์คือการเปลี่ยนโครงสร้างของโปรตีนโดยการจับกับบริเวณที่ไม่ชอบน้ำในโปรตีน ดังนั้นจึงส่งเสริมการรวมตัวและการตกผลึกระหว่างโมเลกุลโปรตีน กระบวนการรวมตัวและการตกผลึกนี้สามารถย้อนกลับได้ ดังนั้นการตกผลึกของโปรตีนสามารถเกิดขึ้นได้โดยการเพิ่ม IPTG หรือผลึกโปรตีนสามารถละลายได้โดยการนำ IPTG ออก
ในการทดลองการตกผลึกของโปรตีน โดยปกติแล้ว IPTG จะถูกเติมลงในสารละลายโปรตีนเป็นความเข้มข้นสุดท้ายที่ 1mM IPTG ที่มีความเข้มข้นต่ำนี้สามารถหลีกเลี่ยงการเหนี่ยวนำโปรตีนมากเกินไป ดังนั้นจึงบรรลุผลการตกผลึกที่ดีขึ้น ในเวลาเดียวกัน IPTG ยังสามารถทำหน้าที่เป็นพี่เลี้ยงระดับโมเลกุลเพื่อช่วยในการพับและการรวมตัวของโปรตีนที่ถูกต้อง ซึ่งจะทำให้ได้ผลึกโปรตีนที่สม่ำเสมอมากขึ้น
ควรสังเกตว่า IPTG ไม่ส่งเสริมการตกผลึกของโปรตีนในทุกกรณี โปรตีนบางชนิดไม่ไวต่อ IPTG หรือเนื่องจากโครงสร้างและคุณสมบัติโดยธรรมชาติที่ไม่เหมาะสำหรับการตกผลึก จำเป็นต้องมีการตรวจสอบความถูกต้องทางการทดลองและการปรับให้เหมาะสมสำหรับโปรตีนต่างๆ เพื่อกำหนดเงื่อนไขและวิธีการตกผลึกที่เหมาะสมที่สุด
อาการไม่พึงประสงค์
ความเป็นพิษต่อเซลล์

ความเป็นพิษต่อเซลล์โปรคาริโอต
แม้ว่า IPTG มักใช้เพื่อกระตุ้นการแสดงออกของยีนในเซลล์โปรคาริโอต แต่ความเข้มข้นสูงของ IPTG อาจส่งผลเป็นพิษต่อเซลล์โปรคาริโอต การวิจัยพบว่าเมื่อความเข้มข้นของ IPTG สูงเกินไป อาจรบกวนกระบวนการเผาผลาญปกติภายในเซลล์ได้ ตัวอย่างเช่น อาจส่งผลต่อการเผาผลาญพลังงานของเซลล์ รบกวนวิถีทางต่างๆ เช่น ไกลโคไลซิสและวงจรกรดไตรคาร์บอกซิลิก ส่งผลให้การผลิต ATP ในเซลล์ลดลง และส่งผลต่อการเจริญเติบโตและการเพิ่มจำนวนของเซลล์ นอกจากนี้ความเข้มข้นสูงของ IPTG ยังอาจทำลายความสมบูรณ์ของเยื่อหุ้มเซลล์ เพิ่มการซึมผ่านของเยื่อหุ้มเซลล์ นำไปสู่การรั่วไหลของสารภายในเซลล์ และปล่อยให้สารที่เป็นอันตรายจากสภาพแวดล้อมนอกเซลล์เข้าสู่เซลล์ ซึ่งส่งผลให้เซลล์ตาย การทดลองพบว่าเมื่อเพาะเชื้อ Escherichia coli ในตัวกลางที่มี IPTG ที่มีความเข้มข้นสูง อัตราการเติบโตของแบคทีเรียจะลดลงอย่างมาก และจำนวนแบคทีเรียที่มีชีวิตจะค่อยๆ ลดลงเมื่อขยายเวลาการเพาะปลูกออกไป สิ่งนี้บ่งชี้ว่า IPTG ที่มีความเข้มข้นสูงมีฤทธิ์ยับยั้งและฆ่า Escherichia coli ได้
ความเป็นพิษต่อเซลล์ยูคาริโอต
นอกจากเซลล์โปรคาริโอตแล้ว IPTG ยังอาจเป็นพิษต่อเซลล์ยูคาริโอตอีกด้วย โครงสร้างและการทำงานระหว่างเซลล์ยูคาริโอตและเซลล์โปรคาริโอตมีความแตกต่างบางประการ แต่ IPTG อาจยังคงส่งผลต่อการทำงานทางสรีรวิทยาปกติของเซลล์ยูคาริโอตผ่านวิถีทางต่างๆ ในด้านหนึ่ง IPTG อาจรบกวนเส้นทางการส่งสัญญาณภายในเซลล์ยูคาริโอต การส่งสัญญาณภายในเซลล์มีบทบาทสำคัญในการควบคุมกระบวนการต่างๆ เช่น การเติบโต การสร้างความแตกต่าง และการตายของเซลล์ IPTG อาจเปลี่ยนแปลงความเข้มและทิศทางของการส่งสัญญาณโดยการโต้ตอบกับโมเลกุลการส่งสัญญาณบางอย่างภายในเซลล์ ซึ่งส่งผลต่อกิจกรรมทางสรีรวิทยาตามปกติของเซลล์


ความเป็นพิษต่อเซลล์ยูคาริโอต
ในทางกลับกัน IPTG อาจกระตุ้นการตอบสนองความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในเซลล์ยูคาริโอต ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันหมายถึงความไม่สมดุลระหว่างการออกซิเดชันในเซลล์และฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ ซึ่งนำไปสู่การเพิ่มขึ้นของการผลิตสายพันธุ์ออกซิเจนปฏิกิริยา (ROS) ROS ที่มากเกินไปสามารถโจมตีชีวโมเลกุล เช่น DNA, โปรตีน และไขมันภายในเซลล์ ทำให้เกิดความเสียหายต่อเซลล์และความบกพร่องในการทำงาน การวิจัยพบว่าภายใต้เงื่อนไขบางประการ การรักษา IPTG ของเซลล์ยูคาริโอตจะเพิ่มระดับ ROS ภายในเซลล์อย่างมีนัยสำคัญ ร่วมกับการมีชีวิตของเซลล์ลดลงและอัตราการตายของเซลล์เพิ่มขึ้น สิ่งนี้ชี้ให้เห็นว่า IPTG อาจกระตุ้นการตอบสนองต่อความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและเป็นพิษต่อเซลล์ยูคาริโอต
ป้ายกำกับยอดนิยม: iptg ผง cas 367-93-1 ซัพพลายเออร์ ผู้ผลิต โรงงาน ขายส่ง ซื้อ ราคา จำนวนมาก ขาย




