Sephadex G75เป็นฟิลเลอร์ตัวกรองเจลที่มีประสิทธิภาพดี จัดทำขึ้นโดยการเชื่อมโยงไปถึง dextran และ epichlorohydrin มันเป็นเจลรูปลูกปัดที่มีกลุ่มไฮดรอกซิลจำนวนมากซึ่งง่ายต่อการบวมในน้ำและสารละลายอิเล็กโทรไลต์ ขีด จำกัด การยกเว้นสูงสุดของสารประกอบนี้คือ 80000 และระดับบวมที่เฉพาะเจาะจงขึ้นอยู่กับปริมาณของเรซินแห้งและสภาพการทำงาน ตัวอย่างเช่นภายใต้เงื่อนไขบางประการระดับบวมของเรซินแห้งอาจเป็น 519ml/g เมื่อช่วงค่า pH ในการทำงานคือ 6.210 (5.210 สำหรับผลิตภัณฑ์บางอย่าง) สารประกอบสามารถคงที่ ขอแนะนำให้เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเย็นและห่างจากแสงในช่วงอุณหภูมิ 430 องศา (หรือ 425 องศา) เพื่อรักษาประสิทธิภาพและความมั่นคง สารนี้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับ biomolecules ขนาดใหญ่ที่มีน้ำหนักโมเลกุลมากกว่า 80000 ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการกลั่นน้ำทะเลและการเปลี่ยนบัฟเฟอร์ของชีวโมเลกุลขนาดใหญ่ดังกล่าว ผ่านการดำเนินการขั้นตอนหนึ่ง - มันเป็นไปได้ที่จะแยกออกจากกันอย่างรวดเร็วกำจัดมลพิษและถ่ายโอนโมเลกุลไปยังสารละลายบัฟเฟอร์ใหม่ นอกเหนือจากการกลั่นน้ำทะเลและการเปลี่ยนบัฟเฟอร์ Sephadex G-75 ยังเหมาะสำหรับกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ของชีวโมเลกุลขนาดใหญ่
 |
 |
Sephadex G75เป็นเจล dextran ซึ่งส่วนใหญ่ใช้สำหรับการแยกและเทคโนโลยีการทำให้บริสุทธิ์ในชีวเคมีและชีววิทยาโมเลกุล การใช้งานหลักของสารนี้มีดังนี้:
ในกระบวนการกลั่นน้ำทะเลสามารถกำจัดเกลือได้อย่างมีประสิทธิภาพ ข้อได้เปรียบของสารนี้คือมันง่ายต่อการใช้งานเร็วและสามารถบรรลุการแยกเกลือออกจากที่มีประสิทธิภาพโดยไม่ต้องเปลี่ยนกิจกรรมของชีวโมเลกุล นอกจากนี้เนื่องจากความเสถียรทางเคมีที่ยอดเยี่ยมและความเข้ากันได้ทางชีวภาพจึงเหมาะสำหรับการกลั่นน้ำทะเลของชีวโมเลกุลต่าง ๆ รวมถึงโปรตีนเปปไทด์กรดนิวคลีอิก ฯลฯ ในการใช้งานจริง
สารนี้มีแอพพลิเคชั่นที่หลากหลายในการเปลี่ยนบัฟเฟอร์โดยเฉพาะอย่างยิ่งในสาขาชีวเคมีและชีววิทยาโมเลกุล ตัวอย่างเช่นในกระบวนการของการทำให้บริสุทธิ์โปรตีนบางครั้งจำเป็นต้องถ่ายโอนโปรตีนจากระบบบัฟเฟอร์หนึ่งไปยังระบบบัฟเฟอร์อื่นที่เหมาะสมกว่าสำหรับความมั่นคงและกิจกรรม และสารนี้สามารถบรรลุเป้าหมายนี้ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ในกระบวนการสกัดกรดนิวคลีอิกจำเป็นต้องแยกกรดนิวคลีอิกออกจากสารละลายที่มีสิ่งเจือปนและเกลือและถ่ายโอนไปยังบัฟเฟอร์ใหม่สำหรับการดำเนินการในภายหลัง นอกจากนี้ยังใช้กับสถานการณ์นี้ ในระหว่างการเพาะเลี้ยงเซลล์บางครั้งจำเป็นต้องเปลี่ยนสื่อการเพาะเลี้ยงหรือบัฟเฟอร์เพื่อรักษาการเติบโตของเซลล์และกิจกรรม มันสามารถใช้ในการลบสารที่เป็นอันตรายออกจากสื่อวัฒนธรรมเก่าหรือบัฟเฟอร์และแนะนำสื่อวัฒนธรรมใหม่หรือบัฟเฟอร์
การกรองโมเลกุล
ในการวิจัยโปรตีนและกระบวนการเตรียมการมักจะต้องแยกโปรตีนเป้าหมายออกจากสารผสมที่ซับซ้อน มันสามารถแยกโปรตีนตามขนาดของพวกเขาซึ่งจะได้รับการทำให้บริสุทธิ์โปรตีน โดยการปรับเงื่อนไขการชะล้างเช่นความแข็งแรงของไอออนและค่า pH ของ eluent ประสิทธิภาพการแยกโปรตีนสามารถปรับให้เหมาะสมต่อไปได้ นอกเหนือจากโปรตีนและกรดนิวคลีอิกแล้วยังสามารถใช้สำหรับการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของชีวโมเลกุลอื่น ๆ เช่นโพลีแซคคาไรด์, เอนไซม์, แอนติบอดี ฯลฯ ความเร็วในการเคลื่อนไหวของ biomacromolecules เหล่านี้ในเจลขึ้นอยู่กับขนาดและรูปร่าง แม้ว่าสารนี้จะไม่ได้ใช้โดยตรงเป็นเครื่องมือสำหรับการกำหนดน้ำหนักโมเลกุล แต่ก็สามารถใช้เป็นเครื่องมือเสริมในการกำหนดน้ำหนักโมเลกุล
ในกระบวนการของการทำให้บริสุทธิ์โปรตีนมักจะจำเป็นต้องกำจัดสิ่งเจือปนโมเลกุลขนาดเล็กเช่นเกลือ, เมตาบอไลต์โมเลกุลขนาดเล็ก, แกนด์ที่ไม่ผูกพัน ฯลฯ จากสารละลายโปรตีน สารนี้สามารถกำจัดสิ่งเจือปนโมเลกุลขนาดเล็กเหล่านี้ได้อย่างมีประสิทธิภาพออกจากสารละลายโปรตีนซึ่งจะเป็นการปรับปรุงความบริสุทธิ์ของโปรตีน เอฟเฟกต์ตะแกรงโมเลกุลของมันช่วยให้โมเลกุลขนาดเล็กเหล่านี้ถูกกำจัดออกไปได้อย่างมีประสิทธิภาพส่งผลให้กรดนิวคลีอิกบริสุทธิ์ การเตรียมเอนไซม์มักจะมีสิ่งสกปรกโมเลกุลขนาดเล็กเช่นพื้นผิวที่ไม่ได้ทำปฏิกิริยาสารยับยั้งเมตาโบไลต์ ฯลฯ สิ่งสกปรกเหล่านี้อาจส่งผลกระทบต่อกิจกรรมและความเสถียรของเอนไซม์ ผ่านการกรองเจลของวัสดุสิ่งเจือปนโมเลกุลขนาดเล็กเหล่านี้สามารถลบออกได้อย่างมีประสิทธิภาพและความบริสุทธิ์ของการเตรียมเอนไซม์สามารถปรับปรุงได้ นอกจากโปรตีนและกรดนิวคลีอิกแล้ว
จำลองการส่งสัญญาณระหว่างเซลล์
การส่งสัญญาณระหว่างเซลล์เป็นกลไกการควบคุมหลักของกิจกรรมชีวิตที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการที่ซับซ้อนเช่นการรับรู้เซลล์การแปลงสัญญาณและการตอบสนองทางสรีรวิทยา การวิจัยแบบดั้งเดิมมักจะอาศัยแบบจำลองเซลล์สด แต่มีข้อ จำกัด เช่นเครือข่ายสัญญาณที่ซับซ้อนและปัจจัยรบกวนหลายอย่างSephadex G75เป็นสื่อการกรองเจลเดกซ์ทรานคลาสสิก โครงสร้างที่มีรูพรุนและเอฟเฟกต์ตะแกรงโมเลกุลให้แบบจำลองทางกายภาพที่เป็นเอกลักษณ์สำหรับการจำลองการส่งสัญญาณระหว่างเซลล์
แบบจำลองทางกายภาพสำหรับจำลองการส่งสัญญาณระหว่างเซลล์โดยใช้ Sephadex G-75
การจำลองทางแยกช่องว่างระหว่างเซลล์
Gap Junction เป็นช่องทางน้ำที่เกิดขึ้นระหว่างเซลล์ที่อยู่ติดกันผ่านตัวเชื่อมโยงช่วยให้สามารถแลกเปลี่ยนโมเลกุลขนาดเล็กที่มีน้ำหนักโมเลกุลได้ฟรีฟรี<1500 Da. The pore size range of Sephadex G-75 (40-300 μ m) is much larger than that of intercellular junctions (about 1.5 nm), but its porous structure can simulate molecular diffusion processes in local microenvironments. For example:
การก่อตัวของโมเลกุลสัญญาณการไล่ระดับสี: ความเข้มข้นที่แตกต่างกันของโมเลกุลของสัญญาณ (เช่น Camp, Ca ²+) ถูกโหลดลงในคอลัมน์เจล ความแตกต่างของอัตราการแพร่กระจายของโมเลกุลขนาดเล็กในรูขุมขนเจลสามารถสังเกตได้ผ่านเอฟเฟกต์ตะแกรงโมเลกุลและการส่งสัญญาณการไล่ระดับสีของสัญญาณทางเคมีระหว่างเซลล์สามารถจำลองได้
การจำลองการตอบสนองเสริมฤทธิ์กัน: โมเลกุลที่มีปฏิสัมพันธ์สองโมเลกุล (เช่นแกนด์และตัวรับ) จะถูกโหลดที่ปลายทั้งสองของคอลัมน์เจลตามลำดับและจลนพลศาสตร์ที่มีผลผูกพันของพวกเขาจะถูกวิเคราะห์ผ่านความแตกต่างของเวลาการชะล้างเพื่อจำลองกระบวนการรับรู้โมเลกุลในการสื่อสารโดยตรงระหว่างเซลล์
การจำลองการสัมผัสระดับโมเลกุลบนพื้นผิวเมมเบรน
การสื่อสารระหว่างโมเลกุลพื้นผิวของเมมเบรนขึ้นอยู่กับการโต้ตอบเฉพาะของโปรตีนพื้นผิวเมมเบรนของเซลล์ Sephadex G-75 สามารถจำลองกระบวนการนี้ผ่านการปรับเปลี่ยนการทำงาน:
ตัวรับลิแกนด์การทดลองที่มีผลผูกพัน: โปรตีนตัวรับ biotinylated (เช่น EGFR) ได้รับการแก้ไขบนพื้นผิวของอนุภาคเจล, แกนด์เรืองแสงที่มีป้ายกำกับ (เช่น EGF) ถูกจับผ่านระบบไบโอติน Streptavidin
การวิเคราะห์การแข่งขันที่มีผลผูกพัน: โหลดคอมเพล็กซ์ตัวรับล่วงหน้าในคอลัมน์เจลเพิ่มสารยับยั้งการแข่งขันที่มีความเข้มข้นที่แตกต่างกัน (เช่นแอนติบอดีต่อต้าน EGFR) คำนวณค่าคงที่การยับยั้ง (KI) ผ่านการเปลี่ยนแปลงสูงสุด
การจำลองการส่งสัญญาณเคมี
การส่งสัญญาณเคมีขึ้นอยู่กับการแพร่กระจายของโมเลกุลการส่งสัญญาณทางเคมี (เช่นฮอร์โมนและไซโตไคน์) ที่หลั่งออกมาจากเซลล์ผ่านของเหลวในร่างกายหรือเมทริกซ์นอกเซลล์ไปยังเซลล์เป้าหมาย Sephadex G - 75 สามารถสร้างแบบจำลองการแพร่กระจายสามมิติ:
การจำลองระบบ Paracrine: เซลล์หลั่ง (เช่นแมคโครฟาจ) และเซลล์เป้าหมาย (เช่นเซลล์ T) จะถูกห่อหุ้มตามลำดับในเจลไมโครสเฟียร์และสถานะการเปิดใช้งานของเซลล์เป้าหมาย (เช่นการแสดงออกของ CD69) จะถูกสังเกตผ่านการเพาะเลี้ยง CO
การส่งสัญญาณต่อมไร้ท่อ: ฮอร์โมนที่มีฉลากเรืองแสง (เช่นอินซูลิน) ถูกโหลดลงในคอลัมน์เจลและการโต้ตอบกับรูขุมขนเจลจะถูกวิเคราะห์ผ่านเวลาการชะและครึ่งหนึ่ง - ชีวิตของฮอร์โมนในเลือดไหลเวียน
แอปพลิเคชันกรณีของ Sephadex G-75 ในการวิจัยการส่งสัญญาณเซลล์
การวิจัยเกี่ยวกับการส่งสัญญาณสัญญาณเซลล์เม็ดเลือดแดงและฟังก์ชั่นอินทิกริน
ตัวรับการยึดเกาะของเกล็ดเลือด Integrin IIB 3 เป็น glycoprotein ที่อุดมสมบูรณ์ที่สุดบนพื้นผิวของเยื่อหุ้มเกล็ดเลือดและเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการแข็งตัวของเลือดและการก่อตัวของก้อน ศึกษาการใช้ Sephadex G-75 เพื่อจำลองการทำงานร่วมกันระหว่างเกล็ดเลือดและคอลลาเจน subendothelial:
แบบจำลองการเปิดใช้งาน Integrin: Integrin IIB 3 ที่บริสุทธิ์ได้รับการแก้ไขบนพื้นผิวของอนุภาคเจลและเพิ่ม fibrinogen (FG) ที่ละลายน้ำได้เป็นแกนด์ จลนพลศาสตร์ที่มีผลผูกพันถูกตรวจพบโดยเรโซแนนซ์พื้นผิวพลาสโมน (SPR) พบว่าความสัมพันธ์ของ Integrin to FG หลังจากการเปิดใช้งานดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (KD ลดลงจากμ m เป็น NM)
การตรวจคัดกรองยา Antiplatelet: preload integrin fg complex ในคอลัมน์เจลเพิ่มยาต้านเกล็ดเลือดที่มีความเข้มข้นที่แตกต่างกัน (เช่น tirofiban) คำนวณอัตราการยับยั้งของยาในกิจกรรมอินทิกริน
กฎระเบียบของเส้นทางการส่งสัญญาณที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก
เซลล์มะเร็งส่งเสริมการแพร่กระจายและการแพร่กระจายผ่านการเปิดใช้งานที่ผิดปกติของเส้นทางการส่งสัญญาณเช่น MAPK และ PI3K/AKT Sephadex G-75 สามารถใช้ในการแยกและชำระล้างโปรตีนคีย์ในเส้นทางการส่งสัญญาณ:
การวิจัยทางเดินสัญญาณ EGFR: โปรตีน EGFR ได้รับการทำให้บริสุทธิ์โดยการกรองเจล Sephadex G-75 และสถานะฟอสโฟรีเลชั่นของมันถูกวิเคราะห์โดยสเปคตรัมมวล พบว่าระดับฟอสโฟรีเลชั่นของไซต์ Y1068 และ Y1086 ของ EGFR เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหลังจากการกระตุ้น EGF ซึ่งเปิดใช้งานสัญญาณ ERK1/2 และ AKT ปลายน้ำ
การวิเคราะห์กลไกการดื้อยา: ในยา - เซลล์มะเร็งกระเพาะอาหารที่ดื้อยา (SGC7901/VCR) โปรตีน UHRF1 ถูกแยกและทำให้บริสุทธิ์โดย Sephadex G-75 และพบว่าการลดลงของยาเสพติด
การส่งสัญญาณเซลล์ภูมิคุ้มกันและการควบคุมโพลีแซคคาไรด์
สาหร่ายสีแดง polysaccharides (BFP) เพิ่มการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันโดยการเปิดใช้งาน NF - κ B และเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK ในแมคโครฟาจ งานวิจัยเกี่ยวกับการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของ BFP และส่วนประกอบ (F1, F2, F3) โดยใช้ Sephadex G-75:
Polysaccharide component analysis: BFP, F1, F2 and F3 with purity>ได้รับ 95% จากการกรองเจล Sephadex G-75 รวมกับ DEAE เซลลูโลส 52 การแลกเปลี่ยน chromatography และน้ำหนักโมเลกุลของพวกเขาคือ 120 kDa, 85 kDa, 60 kDa และ 45 kDa ตามลำดับ
การเปิดใช้งานเส้นทางสัญญาณ: ในรูปแบบ macrophage RAW264.7, BFP และส่วนประกอบของมันสามารถกระตุ้นการหลั่ง NO และ TNF - และกลไกของมันเกี่ยวข้องกับ NF - κ B ส่วนประกอบที่บริสุทธิ์คั่นด้วย Sephadex G - 75 แสดงให้เห็นว่า F1 มีผลการเปิดใช้งานที่แข็งแกร่งที่สุดใน NF - κ B และ MAPK เส้นทาง (เพิ่มการผลิต 2.5 เท่าและ TNF - การหลั่ง 3 ครั้ง)
ป้ายกำกับยอดนิยม: Sephadex G75 CAS 37224-29-6, ซัพพลายเออร์, ผู้ผลิต, โรงงาน, ขายส่ง, ซื้อ, ราคา, จำนวนมาก, สำหรับขาย