dihydroethidiumหมายเลข CAS 104821-25-2 สูตรโมเลกุล C21H21N3 ที่มีน้ำหนักโมเลกุลที่แม่นยำ 315.41 เป็นสารประกอบสำคัญที่มีการใช้งานทางชีวภาพอย่างกว้างขวาง มันมักจะปรากฏเป็นผงผลึกละเอียดตั้งแต่สีชมพูถึงสีม่วง สีที่เป็นเอกลักษณ์นี้ทำให้ง่ายต่อการจดจำในห้องปฏิบัติการและให้พื้นหลังฟลูออเรสเซนต์ตามธรรมชาติสำหรับการใช้เป็นโพรบเรืองแสง ในการวิจัยทางเคมีและชีวภาพมันมักจะใช้เป็นโพรบในการตรวจจับสายพันธุ์ออกซิเจนปฏิกิริยาโดยเฉพาะอย่างยิ่งในการตรวจจับแอนไอออน superoxide ภายในเซลล์แสดงให้เห็นว่ามีประสิทธิภาพสูงมาก สีย้อมนี้สามารถเข้าสู่เซลล์ได้อย่างอิสระและ dehydrogenate เพื่อสร้าง ethidium bromide โพรบนี้มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในเซลล์ NK และเป็นสีย้อมที่สำคัญสำหรับการระบุการเพิ่มจำนวนเซลล์และการขาดออกซิเจนในเนื้องอก
|
|
สูตรเคมี |
C56H92O29 |
มวลที่แน่นอน |
1229 |
น้ำหนักโมเลกุล |
1229 |
m/z |
1229 (100.0%), 1230 (60.6%), 1231 (18.0%), 1231 (6.0%), 1232 (3.6%), 1232 (3.5%), 1230 (1.1%), 1233 (1.1%), 1230 (1.1%) |
การวิเคราะห์องค์ประกอบ |
C, 54.71; H, 7.54; O, 37.74 |
dihydroethidiumเป็นโพรบฟลูออเรสเซนต์สีน้ำเงินที่สามารถเจาะเซลล์มีบทบาทสำคัญในสาขาชีววิทยาและการแพทย์ คุณสมบัติการเรืองแสงที่เป็นเอกลักษณ์ของมันช่วยให้สามารถตรวจจับระดับของแอนไอออน superoxide (o 2-) ภายในเซลล์จึงเผยให้เห็นกลไกของสายพันธุ์ออกซิเจนปฏิกิริยาในสรีรวิทยาของเซลล์และพยาธิวิทยา

1. การถ่ายภาพเซลล์
Dihydroethylene เป็นโพรบเรืองแสงสามารถเข้าสู่เซลล์และผูกกับ DNA เปล่งแสงเรืองแสงสีแดง ดังนั้นจึงมีการใช้กันอย่างแพร่หลายในเทคโนโลยีการถ่ายภาพเซลล์เพื่อตรวจสอบสถานะรีดอกซ์ภายในเซลล์แบบเรียลไทม์ ผ่านอุปกรณ์ต่าง ๆ เช่นกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์หรือการไหลของไซโตเมทรีนักวิจัยสามารถสังเกตการกระจายและการเปลี่ยนแปลงของ dihydroethylenediamine ในเซลล์ดังนั้นจึงเข้าใจสถานะรีดอกซ์ของเซลล์ในสถานะทางสรีรวิทยาหรือพยาธิวิทยา
2. การตรวจจับสถานะของ Redox
คุณสมบัติการเรืองแสงของ ethylene dihydrogen ingot ทำให้เป็นเครื่องมือที่เหมาะสำหรับการตรวจจับสถานะรีดอกซ์ ภายในเซลล์ dihydroethylenediamine สามารถออกซิไดซ์โดยแอนไอออน superoxide เพื่อสร้าง ethylenediamine ซึ่งผูกกับ DNA และปล่อยฟลูออเรสเซนต์สีแดง ดังนั้นโดยการตรวจจับความเข้มของฟลูออเรสเซนต์ของ dihydroethylenediamine ระดับของแอนไอออน superoxide ในเซลล์สามารถสะท้อนได้ทางอ้อมดังนั้นจึงประเมินสถานะรีดอกซ์ของเซลล์ วิธีการตรวจจับนี้มีข้อดีของความไวสูงความจำเพาะและความเร็วสูงซึ่งเป็นเครื่องมือที่ทรงพลังสำหรับการศึกษาการเปลี่ยนแปลงแบบไดนามิกของสถานะรีดอกซ์ของเซลล์


3. การวิจัยเนื้องอก
Dihydroethylene มีการใช้งานที่หลากหลายในการวิจัยเนื้องอก เนื่องจากระดับรีดอกซ์สูงของเซลล์เนื้องอก dihydroethylenediamine สามารถทำหน้าที่เป็นเครื่องหมายเนื้องอกที่มีประสิทธิภาพสำหรับการวินิจฉัยก่อนและการประเมินการรักษาของเนื้องอก นอกจากนี้ dihydroethylenediamine ยังสามารถใช้ในการศึกษากระบวนการทางชีวภาพของการเพิ่มจำนวนเซลล์เนื้องอกการตายของเซลล์และการบุกรุกให้เบาะแสสำคัญสำหรับการเปิดเผยกลไกของการเกิดเนื้องอกและการพัฒนา
4. การคัดกรองยาเสพติด
Dihydroethylenediamine ยังมีบทบาทสำคัญในการตรวจคัดกรองยาเสพติด ยาหลายชนิดในขณะที่ออกแรงผลการรักษาก็มีผลกระทบต่อสถานะรีดอกซ์ของเซลล์ ดังนั้นโดยการตรวจจับความเข้มของฟลูออเรสเซนต์ของ dihydroethylenediamine ผลกระทบของยาเสพติดต่อสถานะรีดอกซ์ของเซลล์สามารถประเมินได้และยารักษาโรคที่มีศักยภาพสามารถคัดกรองได้ นอกจากนี้ dihydroethylenediamine ยังสามารถใช้ในการศึกษากลไกการทำงานร่วมกันระหว่างยาเสพติดและเซลล์มะเร็งซึ่งให้การสนับสนุนที่แข็งแกร่งสำหรับการพัฒนายาและการประยุกต์ทางคลินิก


5. การประเมินความปลอดภัยทางชีวภาพ
Dihydroethylene ยังสามารถใช้ในการประเมินความปลอดภัยทางชีวภาพ ภายใต้อิทธิพลของมลพิษต่อสิ่งแวดล้อมและสารพิษสถานะรีดอกซ์ของเซลล์อาจเปลี่ยนแปลง โดยการตรวจจับความเข้มของฟลูออเรสเซนต์ของ dihydroethylenediamine ผลกระทบของสารเหล่านี้ต่อสถานะรีดอกซ์ของเซลล์สามารถประเมินได้ดังนั้นจึงประเมินความปลอดภัยทางชีวภาพของพวกเขา วิธีนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการประเมินความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นจากมลพิษต่อสิ่งแวดล้อมและสร้างความมั่นใจว่าสุขภาพของมนุษย์
ขั้นตอนโดยละเอียดและสมการทางเคมีที่สอดคล้องกันสำหรับการสังเคราะห์ของdihydroethidiumในห้องปฏิบัติการเป็นกระบวนการที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์สารเคมีอินทรีย์
1. การเตรียมวัตถุดิบ
วัสดุเริ่มต้น: เลือกวัสดุเริ่มต้นที่เหมาะสมซึ่งอาจเป็นสารประกอบที่มีวงแหวนเบนซีนและกลุ่มอะมิโน
ตัวทำละลายและตัวเร่งปฏิกิริยา: เลือกตัวทำละลายที่เหมาะสม (เช่นเอทานอลเมทานอล ฯลฯ ) และตัวเร่งปฏิกิริยา (เช่นตัวเร่งปฏิกิริยาโลหะทรานซิชัน) ขึ้นอยู่กับประเภทของปฏิกิริยา
2. ปฏิกิริยาขั้นตอนแรก: บทนำและการดัดแปลงแหวนเบนซีน
ประเภทปฏิกิริยา: ปฏิกิริยาการทดแทนหรือปฏิกิริยาการมีเพศสัมพันธ์ของไฮโดรคาร์บอนอะโรมาติก
ขั้นตอนที่เฉพาะเจาะจง: ภายใต้การกระทำของตัวเร่งปฏิกิริยาวัสดุเริ่มต้นจะทำปฏิกิริยากับแหวนเบนซีนที่เหมาะสมแนะนำรีเอเจนต์ (เช่นกรดฟีนิลโบนิค, เบนซีนฮาโลเจน ฯลฯ ) เพื่อแนะนำโครงสร้างวงแหวนเบนซิน
สมการทางเคมี: เนื่องจากโครงสร้างที่ไม่รู้จักของสารตั้งต้นและผลิตภัณฑ์เฉพาะสูตรทั่วไปจึงใช้ที่นี่เพื่อเป็นตัวแทน:
เริ่มต้นวัสดุ+แหวนเบนซีนแนะนำรีเอเจนต์→ผลิตภัณฑ์ระดับกลาง 1
3. ปฏิกิริยาขั้นตอนที่สอง: บทนำหรือการปรับเปลี่ยนกลุ่มอะมิโน
ประเภทปฏิกิริยา: ปฏิกิริยา Amination หรือปฏิกิริยาการทดแทนเอมีน
ขั้นตอนเฉพาะ: ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมให้ตอบสนองผลิตภัณฑ์ระดับกลาง 1 กับรีเอเจนต์ amination (เช่นเอมีน, อะไซด์ ฯลฯ ) เพื่อแนะนำหรือปรับเปลี่ยนกลุ่มอะมิโน
สมการทางเคมี:
ผลิตภัณฑ์ระดับกลาง 1+ amination reagent →ผลิตภัณฑ์ระดับกลาง 2
4. ปฏิกิริยาขั้นตอนที่สาม: ปฏิกิริยาไฮโดรเจน
ประเภทปฏิกิริยา: ปฏิกิริยาไฮโดรเจน
ขั้นตอนเฉพาะ: ภายใต้การกระทำของตัวเร่งปฏิกิริยา (เช่นแพลตตินัม, แพลเลเดียม, ฯลฯ ) และก๊าซไฮโดรเจนผลิตภัณฑ์ระดับกลาง 2 จะถูกเติมไฮโดรเจนเพื่อให้ได้ dihydroethylene ingot หรือ analogues
สมการทางเคมี:
ผลิตภัณฑ์ระดับกลาง 2+ H2 → Dihydroethylene Ingot (หรือคล้ายกัน)
5. การทำให้บริสุทธิ์และการจำแนกลักษณะ
การทำให้บริสุทธิ์: ชำระล้างผลิตภัณฑ์ผ่านวิธีการต่าง ๆ เช่นการตกผลึกซ้ำและคอลัมน์โครมาโตกราฟี
การจำแนกลักษณะ: ใช้เทคนิคการใช้เช่นสเปกโตรเมตรีมวล, สเปกโทรสโกปีอินฟราเรดและเสียงสะท้อนด้วยแม่เหล็กนิวเคลียร์เพื่ออธิบายลักษณะของผลิตภัณฑ์และยืนยันโครงสร้างและความบริสุทธิ์
dihydroethidium(DHE) เป็นโพรบเรืองแสงที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยทางชีวภาพ คุณสมบัติการเรืองแสงที่เป็นเอกลักษณ์ของมันให้ข้อได้เปรียบที่สำคัญในการตรวจจับสายพันธุ์ออกซิเจนปฏิกิริยาภายในเซลล์ (โดยเฉพาะแอนไอออนซูเปอร์ออกไซด์) ต่อไปนี้คือการแนะนำรายละเอียดเกี่ยวกับคุณสมบัติการเรืองแสงของ ethylene dihydrogen ingots:
Dihydroethylene นั้นเป็นสารประกอบที่ไม่ใช่ฟลูออเรสเซนต์ แต่เมื่อเข้าสู่เซลล์มันสามารถออกซิไดซ์ได้โดยไอออน superoxide ในเซลล์ (O ₂⁻) ซึ่งจะเปลี่ยนเป็นเอทิลีน เอทิลีนไกลคอลเป็นสารประกอบเรืองแสงที่สามารถผูกกับ DNA และ RNA ดังนั้นเมื่อ dihydroethylene glycol ถูกออกซิไดซ์ไปยัง ethylene glycol มันจะผูกกับกรดนิวคลีอิกในเซลล์และปล่อยฟลูออเรสเซนต์สีแดงที่แข็งแรง
มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในลักษณะสเปกตรัมของฟลูออเรสเซนต์ของ dihydroethyl ingots ก่อนและหลังการออกซิเดชั่น เมื่อไม่ได้ออกซิไดซ์ dihydroethyl ingot เองจะไม่ปล่อยฟลูออเรสเซนต์ เมื่อมันถูกออกซิไดซ์ไปยังเอทิลีนออกไซด์ความยาวคลื่นการกระตุ้นสูงสุดของมันมักจะอยู่ที่ประมาณ 488Nm หรือ 530nm และความยาวคลื่นการปล่อยสูงสุดของมันอยู่ที่ประมาณ 610nm สิ่งนี้ทำให้เข้ากันได้กับระบบตัวกรองของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ทั่วไปหรือ cytometers การไหลทำให้การถ่ายภาพเรืองแสงและการวิเคราะห์เชิงปริมาณ
ความเข้มของฟลูออเรสเซนต์ของ dihydroethyl sulfate มีความสัมพันธ์เชิงบวกกับระดับของแอนไอออน superoxide ภายในเซลล์ เมื่อความเข้มข้นของแอนไอออน superoxide ในเซลล์เพิ่มขึ้น dihydroethylenediamine มากขึ้นจะถูกออกซิไดซ์ไปยัง ethylenediamine ซึ่งผูกกับกรดนิวคลีอิกและปล่อยสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ที่แข็งแกร่งขึ้น ดังนั้นโดยการตรวจจับความเข้มของฟลูออเรสเซนต์ของ dihydroethylenediamine ระดับของแอนไอออน superoxide ในเซลล์สามารถสะท้อนออกมาทางอ้อมได้
คอมเพล็กซ์ฟลูออเรสเซนต์ที่เกิดขึ้นจากการรวมกันของ dihydroethylene glycol และกรดนิวคลีอิกมีความเสถียรสูงและไม่ได้ฟอกขาวหรือไฮโดรไลซ์เอนไซม์ได้ง่าย สิ่งนี้ส่งผลให้เกิดความเสถียรของฟลูออเรสเซนต์ที่ดีของ dihydroethylene glycol ในการถ่ายภาพระยะยาวหรือการทดลองติดตามอย่างต่อเนื่องซึ่งเป็นประโยชน์สำหรับการประเมินการเปลี่ยนแปลงแบบไดนามิกของแอนไอออน superoxide ภายในเซลล์อย่างแม่นยำ
โดยการใช้คุณสมบัติการเรืองแสงของ ethylenediamine นักวิจัยสามารถใช้เทคนิคการถ่ายภาพเช่นกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์หรือการไหลของไซโตเมทรีเพื่อตรวจสอบและวิเคราะห์ระดับของแอนไอออน superoxide ในเซลล์แบบเรียลไทม์ วิธีนี้มีข้อดีของความไวสูงความจำเพาะและความเร็วสูงซึ่งเป็นเครื่องมือที่ทรงพลังสำหรับการเปิดเผยกลไกของสายพันธุ์ออกซิเจนปฏิกิริยาในสรีรวิทยาของเซลล์และพยาธิวิทยา
Dihydroethidium (Dihydroethidium, DHE) เป็นโพรบฟลูออเรสเซนต์สีน้ำเงินที่สามารถซึมผ่านได้ซึ่งส่วนใหญ่ใช้ในการตรวจจับประจุลบอนุมูลอิสระ superoxide (O 2-) ในเซลล์ ต่อไปนี้เป็นหลักการของการตรวจจับและกรณีการประยุกต์ในการวิจัยทางชีวภาพ:
หลักการตรวจจับ
DHE สามารถ dehydrogenated โดยไอออน superoxide ภายในเซลล์เพื่อผลิต ethidium (เช่น ethidium bromide) หลังจากถูกกลืนกินโดยเซลล์ที่มีชีวิต Ethidium สามารถผูกกับ RNA หรือ DNA เพื่อผลิตเรืองแสงสีแดง เมื่อระดับไอออนของเซลล์ superoxide ในเซลล์สูงขึ้นจะมีการผลิต ethidium มากขึ้นและเรืองแสงสีแดงจะแข็งแกร่งขึ้น ในทางกลับกันมันอ่อนแอกว่า สิ่งนี้ช่วยให้สามารถตรวจจับระดับประจุลบซูเปอร์ออกไซด์ด้วย DHE ในเวลาเดียวกัน DHE เองก็ฟลูออเรสเซสสีน้ำเงินในไซโตพลาสซึมจนกว่าจะถูกออกซิไดซ์แล้วมันจะถูกแทรกเข้าไปใน DNA ของเซลล์ทำให้การย้อมสีนิวเคลียสเป็นสีแดงฟลูออเรสเซนต์สว่าง
ตัวอย่างแอปพลิเคชัน
การตรวจจับการผลิต ROS ในเนื้อเยื่อตับ: ส่วนเนื้อเยื่อตับจัดทำและบ่มด้วย DHE ส่วนจะถูกตรวจพบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์และเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ DHE-positive คำนวณโดยการวิเคราะห์เชิงปริมาณเชิงปริมาณเพื่อประเมินการผลิต ROS (ปฏิกิริยาออกซิเจนปฏิกิริยา)
ในการสำรวจการเปลี่ยนแปลงของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระและสถานะกลูตาไธโอนรีดอกซ์ของซีดี 34+ ในสถานะ hypoxic และ normoxic: ในการศึกษานี้ superoxide o 2- ถูกระบุว่าใช้ DHE แล้วทำการตรวจสอบ ผลการศึกษาพบว่าปริมาณออกซิเจนมีผลต่อการสร้างซูเปอร์ออกไซด์และเปอร์ออกไซด์โดยมีอัตราการสร้างเปอร์ออกไซด์ที่สูงขึ้นในสถานะปกติ
หลักการและกรณีการใช้งานข้างต้นแสดงให้เห็นว่า DHE ในฐานะโพรบฟลูออเรสเซนต์ superoxide แอนไอออนมีการใช้งานที่หลากหลายในด้านการวิจัยทางชีวภาพ ไม่เพียง แต่สามารถใช้ในการประเมินระดับความเครียดออกซิเดชันในเซลล์ แต่ยังเป็นพื้นฐานที่สำคัญสำหรับกลไกของโรคและการพัฒนาของยาต้านอนุมูลอิสระ
ป้ายกำกับยอดนิยม: Dihydroethidium cas 104821-25-2, ซัพพลายเออร์, ผู้ผลิต, โรงงาน, ขายส่ง, ซื้อ, ราคา, จำนวนมาก, สำหรับขาย